BIOKEMIALLISET TESTIT: TYYPIT, MIHIN NE OVAT JA TÄRKEYS - BIOLOGIA - 2026

Biokemialliset testit mikrobiologian ovat joukko Testattavat kemikaalit kuljetetaan mikro-organismit esittää näytteessä, jotta voidaan tunnistaa ne; Nämä mikro-organismit ovat yleensä bakteereja. Mikrobiologin käytettävissä on suuri joukko biokemiallisia testejä.

Näiden testien valinta perustuu kuitenkin alustaviin havaintoihin, kuten Gram-värjäyskuvio ja kasvuominaisuudet, joiden avulla bakteerit voidaan luokitella tiettyyn luokkaan. Biokemialliset testit perustuvat pääasiassa kunkin bakteerityypin metabolisiin ominaisuuksiin.

Kaikilla bakteereilla ei ole samoja ominaisuuksia, joten tutkitaan, onko niillä jotain tiettyä entsyymiä lisäämällä substraatti ja odottamalla reaktion tapahtumista. Yleensä tämä määritys annetaan värin tai pH: n muutoksen avulla elatusaineessa.

Bakterin luotettavaksi tunnistamiseksi lajityypille vaaditaan usein vähemmän kuin 15 biokemiallista testiä. Biokemiallisten testien suorittaminen voi lisätä luottamusta tunnistamiseen.

Suurin osa näistä biokemiallisista testeistä tehdään seerumilla tai veriplasmalla. Ne voidaan kuitenkin suorittaa myös muilla biologisilla erityksillä, kuten: virtsa, aivo-selkäydinneste, keuhkopussin neste ja uloste.

Luokittelu

Biokemialliset testit voidaan luokitella 3 ryhmään:

yleismaailmallinen

Ne ovat testejä, jotka voidaan suorittaa jokaiselle näytteelle, ja opastavat mikrobiologia seuraavissa biokemiallisissa testeissä, jotka on suoritettava luotettavan tunnistamisen saamiseksi.

esimerkki

Katalaasi- ja oksidaasikoe.

Tasauspyörästöt

Ne ovat testit, jotka suoritetaan näytteessä olevien mikro-organismien tunnistamiseksi lajien tasolle asti.

Tunnistaminen perustuu testien yhdistelmän tuloksiin, koska yksittäiset tulokset eivät ole riittävän informatiivisia tunnistamisen tekemiseksi.

esimerkki

IMViC-testit ja sokerin käyttökokeet.

erityinen

Ne ovat erityisiä testejä tietylle lajiryhmälle tai alalajille. Nämä testit tehdään yleensä varmentamiseksi tai tunnistamiseksi alalajien tasolla. Yksittäiset testit ovat sinänsä informatiivisia.

esimerkki

Y-glutamyyliaminopeptidaasikoe.

Biokemiallisten testien tyypit

Katalaasikoe

Katalaasitesti on testi osoittaa katalaasientsyymin läsnäolo hajottamalla vetyperoksidia happeksi ja veteen. Pieni määrä bakteereita lisätään pisaraan vetyperoksidia (3%) objektilasille.

Katalaasikoe on yksinkertainen testi, jota mikrobiologit käyttävät bakteerilajien tunnistamiseen ja joidenkin mikrobien kykyyn hajottaa vetyperoksidia tuottamalla katalaasi-entsyymiä.

Jos havaitaan happikuplia, se tarkoittaa, että bakteereilla on katalaasi-entsyymi, koska se katalysoi vetyperoksidin hajoamista happea ja vettä. Organismin sanotaan sitten olevan katalaasipositiivisia (esim. Staphylococcus aureus).

Oksidaasikoe

Tätä testiä käytetään tunnistamaan mikro-organismit, jotka sisältävät sytokromioksidaasi-entsyymin (tärkeä elektronin kuljetusketjussa). Sitä käytetään yleisesti erottamaan Enterobacteriaceae- ja Pseudomadaceae-perheet.

Sytokromioksidaasi siirtää elektroneja elektronien kuljetusketjusta happea (lopullinen elektroni-vastaanottaja) ja pelkistää sen veteen. Keinotekoiset elektronidonori- ja vastaanottajamolekyylit toimitetaan oksidaasikokeessa.

Kun elektronidonori hapettuu sytokromioksidaasin vaikutuksesta, väliaine muuttuu tumman violetiksi ja sitä pidetään positiivisena tuloksena. Pseudomonas aeruginosa-mikro-organismi on esimerkki oksidaasipositiivisesta bakteerista.

Suola mannitoliagar (MSA) -testi

Tämän tyyppinen testi on sekä selektiivinen että differentiaalinen. MSA valitsee organismit, jotka kykenevät elämään ympäristöissä, joissa on korkea suolakonsentraatio, kuten Staphylococcus-lajit toisin kuin Streptococcus -lajit, joiden kasvu on estetty näissä olosuhteissa.

Tämän testin differentiaalikomponentti on mannitolisokeri. Organismit, jotka kykenevät käyttämään mannitolia ravintolähteenä, tuottavat käymisen sivutuotteita, jotka ovat happamat ja alentavat siten väliaineen pH: ta.

Elatusaineen happamuus saa pH-indikaattorin, fenolipunaisen, keltaiseksi. Esimerkkejä bakteerilajeista, jotka voidaan erottaa tällä menetelmällä, ovat: Staphylococcus aureus (positiivinen, koska se fermentoi mannitolia) ja Staphylococcus epidermidis (negatiivinen, koska se ei fermentoi mannitolia).

Koagulaasikoe

Koagulaasi on entsyymi, joka auttaa veriplasman hyytymistä. Tämä testi suoritetaan grampositiivisilla ja katalaasipositiivisilla bakteerilajeilla Staphylococcus aureuksen (koagulaasipositiivinen) tunnistamiseksi. Itse asiassa koagulaasi on tämän bakteerilajin virulenssitekijä.

Tämän bakteerin aiheuttaman infektion ympärillä hyytymän muodostuminen suojaa sitä todennäköisesti fagosytoosilta. Tämä testi on erittäin hyödyllinen, kun haluat erottaa Staphylococcus aureus muista Staphylococcus-lajeista, jotka ovat koagulaasia negatiivisia.

Ureaasikoe

Tätä testiä käytetään identifioimaan bakteerit, jotka kykenevät hydrolysoimaan ureaa entsyymi ureaasia käyttämällä. Sitä käytetään yleisesti erottamaan suvun Proteus muista enteerisistä bakteereista.

Urean hydrolyysi tuottaa ammoniakkia yhtenä tuotteena. Tämä heikko emäs nostaa kasvualustan pH: n yli 8,4: n ja pH-indikaattori (fenolipunainen) muuttuu keltaisesta vaaleanpunaiseksi. Esimerkki ureaasipositiivisista bakteereista on Proteus mirabilis.

Mihin biokemialliset testit tehdään?

Mikrobiologian biokemiallisia testejä käytetään diagnosoimaan mikrobien aiheuttamia sairauksia ja seuraamaan niitä torjuvia hoitoja. Lisäksi niitä käytetään tartuntatautien seulontaan ja niiden ennustamiseen.

Mikro-organismien biokemiallinen tunnistaminen tarjoaa kuvan siitä, mihin nämä mikro-organismit kykenevät, koska se on mahdollista erottaa samat lajit eri kantojen erityisillä biokemiallisilla profiileilla.

Erityiset entsyymiaktiivisuudet eroavat mikro-organismin ekologiasta, fysiologiasta tai luonnollisesta elinympäristöstä, jota voidaan joissain tapauksissa pitää tärkeänä informaationa.

Merkitys

Bakteerien muodon, koon ja järjestelyn rakenteelliset erot auttavat vain vähän tunnistamisprosessissa, koska on olemassa monia bakteerilajeja, jotka ovat muodoltaan, kooltaan ja rakenteeltaan samanlaiset.

Tästä syystä bakteerien tunnistaminen perustuu viime kädessä ensisijaisesti eroihin niiden biokemiallisissa aktiivisuuksissa.

Jokaisella bakteerilajilla on hyvin määritelty joukko aineenvaihdunta-aktiivisuuksia, jotka eroavat kaikista muista lajeista. Nämä biokemialliset "sormenjäljet" ovat ominaisuuksia, joita bakteerientsyymit hallitsevat.

Siksi biokemialliset testit ovat tärkeitä, koska ne auttavat tutkijaa tunnistamaan näytteessä esiintyvät patogeenit oikein ja tällä tavalla pystyä suosittelemaan potilaalle sopivaa hoitoa.

Viitteet

1. Beckett, G., Walker, S. ja Rae, P. (2010). Kliininen biokemia (8. painos). Wiley-Blackwell.
2. Clarke, PH, ja Cowan, ST (1952). Biokemialliset menetelmät bakteriologialle. Journal of General Microbiology, 6 (1952), 187 - 197.
3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. ja O'Reilly, J. (2013). Kliininen biokemia (5. painos). Elsevier terveystieteet.
4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Mikrobiologian käytännön opas (2. painos). CRC Press.
5. Harrigan, W. (1998). Elintarvikemikrobiologian laboratoriomenetelmät (3. painos). Academic Press.
6. Vasanthakumari, R. (2009). Käytännöllinen mikrobiologia. BI Publications Pvt Ltd.