- Väriaineet, joita käytetään yksinkertaisessa värjäyksessä
- 6 vaihetta yksinkertaiseen värjäykseen
- Vaihe 1
- havainto
- Vaihe 2
- havainto
- Vaihe 3
- Vaihe 4
- havainto
- Vaihe 5
- Viitteet
Yksittäinen värjäytyminen on värjäysmenettely nopea ja yksinkertainen, jossa yksittäinen väriaine käytetään, niin sitä kutsutaan yksinkertaista. Sitä käytetään pääasiassa näytteessä olevien solujen morfologian ja organisaation määrittämiseen.
Solut ovat luonnollisesti värittömiä, joten on välttämätöntä tehdä niistä jollakin tavalla näkyviä mikroskoopin alla katseltaessa.

Ihmisen poskessolut värjätään yksinkertaisella metyleenisinisellä värjäyksellä.
On tärkeää korostaa, että yksinkertaisessa värjäyksessä käytettyjen väriaineiden on oltava emäksisiä positiivisella varauksella (kationisia), jotta ne voivat sitoutua spontaanisti soluseinämään ja sytoplasmaan.
Nämä solurakenteet ovat negatiivisesti varautuneita. Siksi positiivisesti varautunut väriaine houkuttelee soluja ja sitoutuu niihin spontaanisti. Siten kaikki näytteessä olevat solut värjätään nopeasti.
Väriaineet, joita käytetään yksinkertaisessa värjäyksessä
Mikrobiologisessa laboratoriossa voidaan käyttää useita perusvärjäyksiä. Käytetyimmät ovat:
- metyleenisininen.
- Kristalli violetti.
- Malakiittivihreä.
- Perusfuksiini.
Kaikki nämä väriaineet toimivat hyvin bakteereissa, koska niissä on positiivisesti varautuneita (kationisia) väriioneja (kromoforeja).
Useimpien näiden tahrojen värjäytymisajat ovat suhteellisen lyhyet. Ne vaihtelevat yleensä 30 sekunnista 2 minuuttiin väriaineen affiniteetista riippuen.
On tärkeätä pitää mielessä, että ennen näytteen värjäämistä yksinkertaisella värjäyksellä, se on pidennettävä ja kiinnitettävä lasille. pidennettyä ja kiinteää näytettä kutsutaan musteeksi.
6 vaihetta yksinkertaiseen värjäykseen
Vaihe 1
Aseta objektilasi värjäystelineelle ja levitä haluttu tahra. Anna vastaavan ajan toimia.
Yksinkertainen värjäys vie yleensä muutamasta sekunnista muutamaan minuuttiin käytetystä tahrasta riippuen.
havainto
Tässä vaiheessa on tärkeätä olla ylittämättä käytetyn väriaineen suositeltua aikaa, koska kiteitä voi muodostua levylle tuottaen niin kutsuttuja "esineitä", jotka vääristävät solujen morfologiaa.
Vaihe 2
Pese kalvojen varovasti pullon tislatulla vedellä tai myös hitaasti virtaavalla vesijohtovedellä, kunnes valuminen on kirkasta. Tämä kestää yleensä 5-10 sekuntia.
havainto
Älä kohdista vesivirtaa suoraan pintaan, jotta saman voima ei vahingoita näytettä.
Jos sinulla ei ole tislattua vettä, voit käyttää vesijohtovettä ilman ongelmia, koska se ei vaikuta värjäytymisen tulokseen.
Vaihe 3
Taita objektilasi imukykyisillä paperipyyhkeillä yhteen suuntaan ja hieromatta. Varmista, että kalvon alapinta on puhdas.
Vaihe 4
Tarkkaile värjättyä uppoa mikroskoopin alla. Aloita kaikkein kauimpana olevilla tavoitteilla paikantaaksesi alue, jonka haluat tarkkailla tarkemmin. Muuta tavoitetta päästäksesi lähemmäksi ja lähemmäksi otosta.
havainto
Jos objektiivia käytetään suuremmalla suurennuksella (yleensä 100X), on käytettävä upotusöljyä, koska se auttaa valoa tunkeutumaan paremmin ja kuva näyttää terävämmältä. Suojapeiteä ei tarvitse käyttää.
Vaihe 5
Lopuksi hävitä kaikki näytteet asianmukaisessa astiassa, jossa on asianmukainen merkintä "biologinen vaara".
Viitteet
- (2001). Mikrobiologinen Sovellukset: Laboratory Manual in Yleinen mikrobiologia (8 th ed.). McGraw-Hill-yhtiöt.
- Harisha, S. (2006). Johdanto käytännön bioteknologiaan (1. vaihe). Palomuurimedia.
- Moyes, RB, Reynolds, J., ja Breakwell, DP (2009). Bakteerien alustava värjäys: Yksinkertaiset tahrat. Mikrobiologian nykyiset protokollat (SUPPL. 15), 1-5.
- Pommerville, J. (2013). Alcamo n perusteet mikrobiologian laboratorion (10 th). Jones & Bartlett Learning.
- Prescott, H. (2002). Mikrobiologian laboratorioharjoitukset (5. kurssi). McGraw-Hill-yhtiöt.
- Sumbali, G. & Mehrotra, R. (2009). Mikrobiologian periaatteet (1. vaihe). Tata McGraw-Hill -koulutus.
