KONGON PUNAINEN: OMINAISUUDET, VALMISTELU JA SOVELLUKSET - BIOLOGIA - 2025

Kongopuna on atsoväri proteiinien muodostettu kytkemällä diatsoniumsuolan ja aktiivisen aromaattisen renkaan. Tämä aine pystyy absorboimaan sähkömagneettista säteilyä näkyvällä spektrillä, minkä vuoksi sen väri on voimakas.

Se on negatiivisesti ladattu. Siksi sillä on affiniteetti positiivisesti varautuneisiin solukomponentteihin, kuten tiettyihin proteiiniaineisiin. Sen väri vaihtelee pH: n mukaan. Tässä mielessä, jos väliaine on hapan (<kuin pH 3), väri on voimakkaasti sinistä. PH3 - pH 5,2: n välillä se on fuksiaa (kääntymisalue), ja> pH 5,2: n kanssa väri on syvänpunainen.

Kuivattu Kongon punainen ja Kongon punainen kolloidiliuos. Lähde: Pixinio.com ja Wikipedia.com

Se on erittäin monipuolinen aine, koska sillä on useita käyttötapoja. Sitä on käytetty väriaineena tekstiiliteollisuudessa sekä soluille ja kankaille.

Valmistetaan myös elatusaineita, jotka mittaavat entsymaattisia vaikutuksia, pH-indikaattorina, kontrolliaineena spektrofotometrien asianmukaisen toiminnan arvioinnissa, biofilmien muodostumisen tutkimuksessa tai amyloidien diagnosoinnissa.

Samoin se on mahdollistanut bakteerien ja sienten serotyyppien erottamisen tunnistamalla erityiset rakenteet niiden seinämässä (lipopolysakkaridit).

Ominaisuudet Kongon punainen

Böttiger löysi tämän aineen vuonna 1884. Se on diatsoniumjohdannainen, jonka muodostaa bentsidiinin bis-diatsoehappo naftionihapon kanssa. Kongon punainen molekyyli mittaa 21 Armstrongia ja molekyylipaino on noin 8000 g / mol.

Kongonpunaiselle on tunnusomaista, että se liukenee veteen ja vielä enemmän orgaanisiin liuottimiin, kuten etanoliin, muodostaen kolloidisen liuoksen.

Sillä on affiniteetti selluloosaan, amyloidiseen kudokseen ja positiivisesti varautuneisiin solukomponentteihin.

Valmistautuminen

Congo Red valmistetaan eri konsentraatioissa käytettävästä tekniikasta riippuen. Useimmat käyttävät Kongon punaista 1%, 2%, 0,1%.

Esimerkiksi 2-prosenttisen Kongonpunaisen valmistamiseksi punnitaan 2 g kuivattua ruokaväriä ja lisätään 100 ml tislattua vettä. Sitten se pidetään meripihkan pullossa.

Sovellukset

Väriaineena tekstiiliteollisuudessa

Jonkin aikaa sitä käytettiin laajalti tekstiiliteollisuudessa sen kiinnittymisen vuoksi puuvillaan, mutta tällä hetkellä sitä ei käytetä, koska se on syöpää aiheuttava ja myös koska väri ei ole vakaa ja värimuuttuu kitkalla.

Biofilmien muodostumiskapasiteetin määrittäminen

Mikro-organismien biofilmien muodostavan kyvyn on osoitettu olevan virulenssitekijä.

Tässä mielessä Kongon punaista väriainetta käytetään menetelmänä biofilmien muodostumisen määrittämiseen. Kongon punainen sitoutuu eksopolysakkarideihin, jotka ovat läsnä biofilmissä. Muihin menetelmiin verrattuna se on kuitenkin vähiten suositeltava johtuen suurista vääristä negatiivisista.

Menetelmässä käytetään Kongon punaista agaria, tämä koostuu veriagarista emäksenä, glukoosista (10 g / l) ja Kongon punaisesta väriaineesta (0,4 g / l). Arvioitavat kannat ympätään väliaineeseen ja inkuboidaan 24 tuntia 37 ° C: ssa, ja inkuboidaan myöhemmin 48 tuntia huoneenlämpötilassa.

Positiivinen testi osoitetaan, jos havaitaan mustanvärisiä ja kuivaa ulkoasua kiteisiä pesäkkeitä.

Spektrofotometrien laadunvalvonta

Sen arvioimiseksi, noudattaako absorbanssi- tai transaktiomittauslaite kansainvälisillä säännöksillä vahvistettuja fotometrisiä parametreja, voidaan käyttää yksinkertaista tekniikkaa sen selvittämiseksi, emittoiko laite tuloksia hyväksyttävyysalueilla.

Yksi arviointitekniikoista on Kongon punaisen käyttämistä isosbestipisteeseen perustuen.

Isosbestinen piste on aallonpituus, jolla Kongon punainen emittoi saman absorbanssin pH: sta, konsentraatiosta ja lämpötilasta riippumatta. Absorbanssiarvo on kiinteä ja sitä voidaan käyttää vertailuna.

Kongon punaisen teoreettisen isosbestisen pisteen tiedetään olevan 541 nm. Jos saatu arvo on erilainen, tiedetään, että laitteella on aallonpituuspoikkeamia, ja sen on tarkistettava erikoistunut teknikko.

Elatusaineiden valmistaminen

Ortiz et ai., Kuvaile kasvatusliuosta, joka on valmistettu Kongon punaisella väriaineella ja karboksimetyyliselluloosalla, nimeltään CMC-agar, selluliitin mikrobikantojen havaitsemiseksi; toisin sanoen sellulaasin tuottajia (endoglukoneja, eksoglukanaaseja ja ß-glukosidaasia).

Tällä väliaineella on voimakas väri. Väri häviää endoglukanaasientsyymin vaikutuksesta, joka hajottaa karboksimetyyliselluloosan rakenteen. Tämä viittaa positiiviseen reaktioon.

Viskositeetin ja absorbanssin lasku mahdollistaa entsyymiaktiivisuuden määrittämisen. Esimerkiksi Streptomyces sp.

Mikro-organismien tunnistaminen

Kongonpunaisella on affiniteetti tiettyjen kantojen polysakkaridirakenteisiin, jolloin saadaan aikaan näiden mikro-organismien tunnistaminen. Niistä ovat Escherichia coli ja Shigella flexneri.

Kongon punaista agarmaljoja käytetään myös tunnusomaisten pesäkkeiden, kuten Azospirillum sp: n, saamiseksi, joka antaa mm. Scarlet-punaisia ​​pesäkkeitä.

Solun ja kudoksen tahra

Yksi Kongon punaisen yleisimmistä sovelluksista on sen käyttökelpoisuus amyloidoosin diagnosoinnissa. Tämä outo sairaus koostuu epänormaalin proteiinin kertymisestä soluihin eri elimissä. Tämä epänormaali proteiini valmistetaan luuytimessä ja sitä kutsutaan amyloidiksi.

Kongon punaisella on korkea affiniteetti tähän aineeseen. Tätä ominaisuutta on käytetty osoittamaan sen läsnäolo histologisissa kudosleikkeissä. Kongon punaista käytetään yhdessä hematoksyliinin / eosiinin kanssa tähän tarkoitukseen.

Amyloidisen kudoksen ja Kongon punaisen yhdistyminen tapahtuu ei-polaaristen vety sidosten kautta, karboksyyliryhmien ja aminoryhmien välillä. Amyloidiproteiini tarjoaa karboksyyliryhmät (COOH) ja Kongon punainen aminoryhmän.

Amyloidinen kudos on värjätty eri sävyillä, vaaleanpunaisesta tummanpunaiseksi, kun se näkyy valomikroskoopin alla. Mikroskoopeissa, joissa on kaksinkertaisesti polarisoitunut valo, näitä valmisteita havaitaan patognomonisella omenanvihreällä kahtaistaistumisella.

Toisin sanoen ne edustavat dikroismia, koska amyloidikuidut ovat anisotrooppisia. Tämä havainto vahvistaa diagnoosin.

Kudosvärjäys Kongo-punaisella on yhteensopiva muiden diagnoosimenetelmien, kuten immunosytokemiallisten menetelmien, kanssa ja se voidaan jopa värjätä uudelleen.

PH-indikaattorina

Ominaisuutta kääntyä pH: n muutoksia vastaan ​​käytetään tekniikassa, jota kutsutaan kromoendoskopiaksi.

Tässä tekniikassa käytetään väriaineita ja pH-indikaattoreita, jotka mahdollistavat tiettyjen patologioiden havaitsemisen. Heidän joukossaan on Kongonpunaisen käyttö, joka voi paljastaa varhaisen syöpäpisteen mahalaukun limakalvossa ja jota käytetään happamuuden merkkinä.

Tekniikka perustuu siihen tosiseikkaan, että Kongon punainen happamassa pH: ssa on musta. Siksi sen jälkeen kun Kongon punainen liuos on asetettu mahalaukun limakalvoon, alueet, joilla on vaaleus, valitaan ottamaan näyte biopsiaa varten, ts. Niissä, joissa ei ole hapontuotantoa. Tämä viittaa syöpäkeskuksen esiintymiseen tai parietaalisten solujen menetykseen.

Viitteet

1. "Kongon punainen." Wikipedia, ilmainen tietosanakirja. 8. toukokuuta 2019, 12:13 UTC. 16. toukokuuta 2019, 04:08, es.wikipedia.org.
2. Ortiz M, Uribe D. Uusi menetelmä endoglukanaasiaktiivisuuden kvantifioimiseksi perustuen selluloosa-Kongon punaiseen kompleksiin. Orinoquia. 2011 kesäkuu; 15 (1): 7-15. Saatavana osoitteesta: scielo.org.
3. Peña J, Uffo O. Biofilmin tuotanto Staphylococcus aureuksen genotyypeissä, eristetty naudan mastiitista Kuubassa. Rev Salud Anim.. 2013 joulukuu; 35 (3): 189 - 196. Saatavana osoitteessa: scielo.s
4. Fich F, Chahuán M, Farías M, Cárdenas C, Abarzúa A, Araya G et ai. Ihmisen systeemisen amyloidoosin oireet diagnostisena avaimena: kliininen tapaus. Rev. Chile. 2012 huhtikuu; 140 (4): 499-502. Saatavana: scielo.
5. Duymovich C, Acheme R, Sesini S, Mazziotta D. Spektrofotometrit ja fotokolorimetrit Käytännöllinen päivitysopas. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana 2005, 39 (syyskuu-joulukuu): saatavana osoitteessa redalyc.org
6. Marín J, Díaz J ja Solís J. Kromoendoskopia Helicobacter pylori -infektiossa: onko reaktioaika? Esp Enferm Dig 2012; 104 (1): 1-3
7. Fieser L, Fieser M. 1985. Orgaaninen kemia. Toimituksellinen käännös. Barcelona, ​​Espanja. Saatavana osoitteessa books.google.co.ve
8. Murillo M. Histologiset kudosvärjäystekniikat. Guadalajaran yliopisto, Meksiko. Saatavana osoitteessa: Academia.edu
9. Paillié M. Sellonolyyttisen, ligninolyyttisen ja amylolyyttisen aktiivisuuden määrittäminen Actinobacteria-bakteereista, jotka on eristetty valkosipun (Trifolium repens) risosfäärimaisesta maaperästä. 2012. Pontificia Universidad Javeriana Matemaattis-luonnontieteellinen tiedekunta Teollisuusmikrobiologia Bogotá DC Saatavana osoitteessa: repository.javeriana.edu.co
10. Cárdenas, D, Garrido M, Bonilla R ja Baldani V. Azospirillum sp. Guinea-ruoholla (Panicum maximum Jacq.) Cesar-laaksosta. Laitumet ja rehut, 2010; 33 (3): 1-8 Saatavana: scielo.