TYMIDIFTALEIINI: OMINAISUUDET, VALMISTELU JA SOVELLUKSET - BIOLOGIA - 2026

Tymoliftaleiini on pH-indikaattorin kanssa tieteellinen nimi: 3,3-bis -isobenzofuranone -1 (3H) ja sen kemiallinen kaava on C ₂₈ H ₃₀ O ₄. Se syntetisoidaan ftaalihappoanhydridistä ja timolista.

Tällä pH-indikaattorilla on hyvin erikoiset ominaisuudet, koska erittäin matalassa pH: ssa se on voimakkaasti punainen (pH <0). Myöhemmin on laaja pH-alue, jossa se on täysin väritön (pH 1-9,2), kääntymisalueella 9,3-10,5, missä se voi muuttua siniseksi, kun taas yli 10,5 se on sininen intensiivistä.

Tymolftaleiinin kemiallinen rakenne happamassa pH: ssa (väritön) ja alkalisessa pH: ssa (syvän sininen). Lähde: Dannybalanta /Pxhere.com

Sen sovelluksiin sisältyy happo-emäsindikaattorina toimiminen tietyissä kemiallisissa reaktioissa. Sitä käytetään myös kromogeeninä joissakin kolorimetrisissä reaktioissa, joissa entsymaattinen aktiivisuus arvioidaan. Esimerkiksi alkalisen fosfataasin määrityksessä.

Myrkyllisyyden suhteen se on vähemmän haitallista kuin muut pH-indikaattorit, ja Kansallinen palontorjuntayhdistys (NFPA) on luokitellut tasolle 1 suhteessa sen terveysvaikutuksiin; mikä tarkoittaa, että se ei ole syöpää aiheuttava tai mutageeninen.

Sillä ei myöskään ole erityistä toksisuutta mihinkään kohdeelimeen; toisin sanoen se edustaa alhaista aggression riskiä terveydelle. Suora kosketus ihon ja limakalvojen kanssa voi kuitenkin aiheuttaa lievää ärsytystä.

Toisaalta, syttyvyyden kannalta se luokitellaan arvoksi 1 ja reaktiivisuuden suhteen nollaksi.

ominaisuudet

Kiinteässä muodossa oleva pH-indikaattori tymidiftaleiini on valkoista jauhetta, nestemäisessä tilassa se on voimakasta punaista pH: n ollessa alle nolla, väritön pH-arvossa 1-9,2 ja sininen yli 10,5. Sen moolimassa on 430,54 g / mol, sulamispisteen ollessa (258 ° C), kiehumispisteen ollessa välillä 248-252 ° C. Tiheys on 0,92 g / ml 25 ° C: ssa

Se ei liukene kylmään veteen ja liukenee etanoliin. Se ei ole räjähtävä aine.

Varotoimenpiteinä on pidettävä kuljetuksen aikana varastointia ja käsittelyä erillään voimakkaista hapettimista.

Valmistautuminen

Tilavuusanalyysiin käytetään yleensä pH-indikaattorin tymoftaleiinia pitoisuutena 0,1%. Toimi seuraavasti:

- Punnitaan 100 mg tyyliftaleiinia ja liuotetaan 100 ml: aan 95-prosenttista etyylialkoholia.

Se voidaan myös valmistaa seuraavasti:

- Punnitaan 100 mg tyyliftaleiinia ja liuotetaan 60 ml: aan absoluuttista alkoholia ja lisätään 40 ml tislattua vettä.

- Varastoi huoneenlämmössä (15-25 ° C). On tärkeää, että säilytyspaikka on viileä, ilmastoitu ja ilman kosteutta.

Sovellukset

Alkalisen fosfataasin määritys

Tämän testin määrittämisessä on tekniikka, joka perustuu hydrolyyttiseen vaikutukseen, joka alkalisella fosfataasilla on tymoftaleiinimonofosfaattiin. Jos alkalista fosfataasia on läsnä, se hydrolysoi tyyliftaleiinimonofosfaattia vapauttaen timolthaleiinin.

Tämä tuottaa sinisen sävyn alkalisessa pH: ssa. Alkalisen fosfataasin entsymaattinen aktiivisuus on suoraan verrannollinen muodostuneen värin voimakkuuteen. Absorbanssi luetaan aallonpituudella 590 nm.

Eturauhasen antigeenin (PSA) määrittäminen

Tässä mielessä Shao F ja yhteistyökumppanit kehittivät vuonna 2018 kolorimetrisen tekniikan, jossa he käyttävät mesopoorisia piidioksidi-nanohiukkasia, jotka vangitsevat tyyliftaleiinimolekyylejä, jotka ovat sitoutuneet voimakkaasti fenyylitretyylioksisilaanin läsnäolon avulla.

Nämä nanopartikkelit puolestaan ​​on päällystetty polyeteenimiinillä (PEI) edistäen sekundaarisen anti-PSA-vasta-aineen sitoutumista.

Toisaalta potilasnäyte on immobilisoitu levylle; ja kun läsnä oleva PSA on kosketuksessa nanohiukkasten kanssa, se sitoutuu vasta-aineisiin. Nanohiukkaset, jotka eivät sitoudu, poistetaan.

Myöhemmin tymidiftaleiini vapautuu helposti lisäämällä alkalista liuosta, joka antaa sinisen sävyn. Väriaste on suoraan verrannollinen PSA-pitoisuuteen.

Arginiinikinaasin tai fosfokinaasin entsyymin aktiivisuuden määrittäminen

Arginiinikinaasin entsymaattinen aktiivisuus voidaan määrittää käyttämällä pH-indikaattorin tymidiftaleiinia. Testi perustuu seuraavaan:

Arginiinikinaasi-entsyymi on fosfotransferaasi, joka osallistuu fosfoarginiinin muodostumiseen, kuten seuraavassa kemiallisessa reaktiossa paljastui:

Lähde: "Arginiinikinaasi." Wikipedia, ilmainen tietosanakirja. 10. heinäkuuta 2018, 13:49 UTC. 20. toukokuuta 2019, 03:58 wikipedia.org/

Jos tämä reaktio suoritetaan pH-indikaattorin tymoftaleiinia vastaan, on mahdollista mitata entsyymiaktiivisuus. Tämä on mahdollista seuraavan selityksen mukaan: reaktio tapahtuu emäksisessä pH: ssa, jossa tymoftaleiini näyttää sinisen värinsä.

Entsymaattinen aktiivisuus mitataan värin häipymisellä, joka heijastuu absorbanssin vähenemisellä 575 nm: ssä, koska entsyymin toimiessa vapautuu protoneja (H +), jotka hapottavat väliainetta.

Tämä aiheuttaa tymoftaleiinin värin menettämisen lähestyessäsi kääntymisaluetta. Jos pH laskee alle 9,2, se muuttuu täysin väritömäksi.

Siksi sinisen värin voimakkuus on käänteisesti verrannollinen entsyymiaktiivisuuteen.

Myrkyllisyys

Ihmisessä

Tämä yhdiste on vähemmän myrkyllinen kuin suurin osa pH-indikaattoreista, koska siihen ei ole tähän mennessä liitetty mitään syöpää aiheuttavia tai mutageenisia vaikutuksia. Se ei ole kuitenkaan täysin vaaratonta: joutuessaan iholle ja limakalvoille voi aiheuttaa punoitusta mainituilla alueilla.

Se voi myös aiheuttaa ei-toivottuja reaktioita vahingossa nieltynä tai hengitettynä.

Jos kosketus tapahtuu suoraan iholle ja limakalvoille, ihoalue tulee pestä runsaalla vedellä vähintään 15 minuutin ajan. Ja jos he havaitsevat ärsytyksen merkkejä, heidän tulisi mennä lähimpään terveyskeskukseen.

Tästä syystä suositellaan käsiteltäessä suojavälineitä, kuten puku, käsineitä ja suojalaseja.

Huolimatta alhaisesta syttymisriskistä, on suositeltavaa olla varovaisuuden vuoksi etäällä sytyttimistä.

Vaikutukset ympäristöön

Vaikka se on vähemmän myrkyllistä ihmisten terveydelle, se on myrkyllistä vesiympäristössä ja vaikuttaa siellä esiintyviin organismeihin. Lisäksi sillä on korkea biokertyvyysteho, ja pitkällä tähtäimellä on mahdollista, että muodostuu ympäristölle haitallisia hajoamistuotteita.

Siksi on vältettävä, että tämä tuote pääsee pinta- tai maanalaisiin vesiin, koska se vaikuttaisi juomaveteen.

Tässä mielessä tätä indikaattoria käyttävien laboratorioiden on hävitettävä jätteensä kussakin maassa voimassa olevien säännösten mukaisesti.

Viitteet

1. Pizzani P, Godoy S, León M, Rueda E, Castañeda M, Arias A. Fytaattisen fosforin kasvavien pitoisuuksien vaikutus fytaasin ja alkalisen fosfataasi-entsyymien aktiivisuuteen nuorten lampaiden suolen epiteelissä. Rev. Cient. (Maracaibo). 2008,18 (1): 59 - 64. Saatavana osoitteessa: scielo.org.
2. "Tymoliftaleiini." Wikipedia, ilmainen tietosanakirja. 22. helmikuuta 2019, 04:40 UTC. 19. toukokuuta 2019, 22:20, es.wikipedia.org.
3. Shao F, Zhang L, Jiao L, Wang X, Miao L, Li H, Zhou F. Entsyymitön immunosorboiva määritys eturauhasen spesifisestä antigeenistä, jota on vahvistettu vapauttamalla Mesoporous-piidioksidin hiukkasiin tarttuneet pH-indikaattorimolekyylit. Anal Chem. 2018; 17; 90 (14): 8673-8679.
4. Yu Z, Pan J, Zhou HM. Suora jatkuva pH-spektrofotometrinen määritys arginiinikinaasiaktiivisuudelle. Proteiini Pept Lett. 2002; 9 (6): 545-52.
5. Scharlau. Tymolftaleiinin käyttöturvallisuustiedote. 2013.Saatavilla osoitteessa: javeriana.edu.co
6. Tymolftaleiinin käyttöturvallisuustiedote. KTT. Heredian kansallinen yliopisto, Costa Rica. Saatavana: Tymolftaleiini% 20 (3).
7. "Arginiinikinaasi." Wikipedia, ilmainen tietosanakirja. 10. heinäkuuta 2018, 13:49 UTC. 20. toukokuuta 2019, 03:58 fi.wikipedia.org.