- Antistreptolysiini O -vasta-aineiden kvantifiointi
- ASTO-tekniikan perusteet
- Tekniikat
- - Puolikvantitatiivinen tekniikka
- Tulkinta
- - Määrällinen tekniikka
- Tulkinta
- Viitearvo
- suosituksia
- Patologiat korkeilla antistreptolysiini O -tiitteillä
- Streptokokkien jälkeiset autoimmuunisairaudet
- Reumakuume
- Akuutti glomerulonefriitti
- Viitteet
O ASO on vasta-generoidaan vasteena infektion aiheuttaja on Streptococcus pyogenes, joka tunnetaan myös nimellä Streptococcus beeta-hemolyyttinen A. Tämä ryhmä tuottaa kaksi eksotoksiineja kanssa hemolyyttinen aktiivisuus vaatii streptolysins "S" ja "O".
Streptolysin S vastaa veren agarissa tapahtuvasta beeta-hemolyysistä ja, vaikka se on myrkyllinen tietyille immuunijärjestelmän soluille, se ei ole antigeeninen. Vaikka streptolysiini O on labiili happea vastaan, se vastaa hemolyysiin, joka tapahtuu veriagarin alapuolella ja tämä on antigeeninen.

Streptococcus pyogenes / Kaavio siitä, mitä tapahtuu ASTO-testissä (aglutinaatioreaktio). (Vasta-aineet, jotka ovat sitoutuneet lateksihiukkasiin, jotka sisältävät spesifisen antigeenin). Lähde: Käyttäjä: Graham Beards / Alejandro Porto
Siksi, kun immuunijärjestelmän solut ovat vuorovaikutuksessa streptolysiini O: n kanssa, syntyy spesifinen immuunivaste, joka generoi B-lymfosyyttien aktivoitumisen.Nämä solu tuottaa vasta-aineita, jotka on suunnattu streptolysiini O: ta vastaan. Siksi vasta-aineita kutsutaan antistreptolysin O.
Streptococcus pyogenes tuottaa erilaisia patologioita, joita ovat: tonsilliitti, erysipelas, impetiigo, puerperal kuume, skarletkuume ja septikemia. Anti-streptolysiini O -vasta-aineet ilmestyvät 8 - 30 päivää infektion alkamisen jälkeen.
Suurin osa näistä infektioista on hyvin yleisiä väestössä, joten ihmisillä on tavallista, että veressä on antistreptolysiini O -vasta-aineita. Matalat tiitterit osoittavat aiemman tartunnan tällä bakteerilla, mutta korkea tai nouseva titteri osoittaa äskettäisen tai jatkuvan tartunnan.
Antistreptolysiini O -vasta-aineiden kvantifiointi
Laboratoriossa anti-streptolysiini "O" -vasta-ainetiitteri voidaan mitata serologisella testillä. Antistreptolysiini O (ASTO) -testi perustuu agglutinaatioreaktioon lateksin kanssa.
Se voidaan tehdä puolikvantitatiivisesti, ilmoittaminen ristiin tai tiitteri voidaan myös kvantifioida. On normaalia eikä merkityksellistä löytää arvoja enintään 200 IU / ml tai Todd-yksikköä / ml. Tämän arvon yläpuolella sitä pidetään positiivisena ja kliinisesti merkittävänä.
Tämä testi ei vaadi potilaan paastoa. Seerumia käytetään näytteenä, ts. Potilaan veri otetaan ja asetetaan putkeen ilman antikoagulanttia, sentrifugoidaan sitten seerumin saamiseksi.
ASTO-tekniikan perusteet
Tekniikassa käytetään lateksipartikkeleita tukemaan streptolysiini O -antigeenin kiinnittämistä. Imeytyneet antigeenipartikkelit saatetaan reagoimaan potilaan seerumin kanssa. Jos potilaalla on antistreptolysin O-vasta-ainetta, nämä sitoutuvat antigeeniin, joka on kiinnittynyt lateksihiukkasiin.
Tämä sitoutuminen aiheuttaa agglutinaation, joka on makroskooppisesti näkyvä. Reaktion voimakkuus on suoraan verrannollinen läsnä olevien vasta-aineiden konsentraatioon.
Tekniikat
- Puolikvantitatiivinen tekniikka
Reaktion voimakkuus voidaan puolittain kvantitoida ristiin. Tätä varten otetaan serologinen reaktiolevy ja asetetaan:
50 ui seerumia ja 50 ui ASTO-reagenssia. Sekoita hyvin puisella hammastikulla ja aseta automaattisekoittimeen 2 minuutiksi. Tarkkailla. Jos automaattista kääntölaitetta ei ole saatavana, se on tehtävä manuaalisesti.
Tulkinta
Jousitus (ilman tasaisia): negatiivinen
1. + = heikko reaktio
2. ++ = lievä reaktio
3. +++ = kohtalainen reaktio
4. ++++ = voimakas reaktio
Seerumit, jotka ovat positiivisia 3 ja 4 ristissä, voidaan määrittää.
- Määrällinen tekniikka
Titterin kvantifioimiseksi tehdään sarjalaimennokset 1: 2, 1: 4: 1: 8, 1:16.
Tätä varten jatketaan seuraavasti: otetaan 4 koeputkea tai Kahn-putkea ja niihin asetetaan 0,5 ml fysiologista suolaliuosta. Sitten ensimmäiseen putkeen lisätään 0,5 ml potilasseerumia. Sekoittaa hyvin. Tämä putki vastaa laimennusta 1: 2.
Sen jälkeen 0,5 ml siirretään putkeen 2 ja sekoitetaan hyvin. Tämä putki vastaa 1: 4-laimennusta ja niin edelleen, kunnes haluttu laimennus saavutetaan.
Ota 50 ui jokaisesta laimennuksesta ja reagoi 50 ui ASTO-reagenssin kanssa agglutinaatiolevyllä, kuten puolikvantitatiivisessa tekniikassa selitetään.
Tulkinta
Suurin laimennus, jossa havaitaan näkyvää taajamista, otetaan huomioon. Laskelmat suoritetaan seuraavasti:
ASTO = Suurimman positiivisen laimennoksen käänteinen x tekniikan herkkyys (vakio).
Esimerkki: Potilas, jonka positiivinen reaktio on korkeintaan 1: 8
ASTO = 8 x 200 IU / ml = 1600 IU / ml tai Todd yksikköä / ml.
Viitearvo
Normaali aikuinen: enintään 200 IU / ml
Normaalit lapset: enintään 400 IU / ml
suosituksia
On suositeltavaa, että potilaisiin kiinnitetään positiivinen ja negatiivinen kontrolli, jotta voidaan varmistaa, että reagenssi on optimaalisessa tilassa. Jos positiivinen kontrolli ei agglutinoitu tai negatiivinen kontrolli agglutinoituu, reagenssia ei voida käyttää.
Reaktio on tulkittava 2 minuutin kuluttua, sen jälkeen se ei ole kelvollinen, jos tapahtuu aglutinaatio. Nämä ovat vääriä positiivisia.
Hyperlipeminen seerumi häiritsee reaktiota. He voivat antaa vääriä positiivisia tuloksia.
Eristetystä ASTO-arvosta ei ole kovin hyötyä. Siihen on liitettävä oireita.
Lisäksi on suositeltavaa suorittaa vähintään 2 ASTO-mittausta, kun epäillään reumakuumea tai streptokokkien jälkeistä glomerulonefriittia, jotta voidaan osoittaa antistreptolysiini O -tasojen nousu ja siten diagnoosin vahvistaminen.
Patologiat korkeilla antistreptolysiini O -tiitteillä
Streptococcus pyogenes- tai A-ryhmän ß-hemolyyttinen Streptococcus-infektio on kärsinyt anti-streptolysiinivasta-aineista.
Niitä ovat: akuutti nielutulehdus, scarlet-kuume, impetiigo, erysipelat, puerperal kuume ja septikemia.
Joillekin potilaille, jotka ovat kärsineet viimeaikaisista tai toistuvista streptokokki-infektioista, voi kehittyä autoimmuunisairauksia jälkiseurauksena tai komplikaatioina streptokokkien jälkeisestä infektiosta, kuten akuutti glomerulonefriitti ja reumaattinen kuume.
Streptokokkien jälkeiset autoimmuunisairaudet
Reumakuume
Se on tulehduksellinen komplikaatio tai jälkitauti, joka voi ilmestyä 1 - 5 viikkoa streptokokki-infektion jälkeen. Antistreptolysiini O -tiitterit nousevat merkittävästi 4 - 5 viikkoa sairauden alkamisen jälkeen.
Korkea ASTO-tiitteri ohjaa diagnoosia, mutta ei liity taudin vakavuuteen eikä sen lasku tarkoita paranemista.
Antistreptolysiini O -vasta-aineet reagoivat ristiin kollageenia ja lihaskuituja vastaan vaikuttaen tiettyihin elimiin (mm. Sydämeen, ihoon, niveliin ja hermostoon).
Tämä komplikaatio tai jälkitaute esiintyy sydämessä, kuume, pahoinvointi, ei-suppuratiivinen muuttomuotoinen polyartriitti, korea jne.
Akuutti glomerulonefriitti
Akuutti glomerulonefriitti on ei-suppuratiivinen jälkitaute, joka tapahtuu johtuen antigeeni-vasta-ainekompleksien laskeutumisesta glomerulaariseen pohjakalvoon.
Streptokokki-infektioiden muodostamien antigeeni-vasta-ainekompleksien (ag-ac) muodostuminen ja kierto voi johtaa eksudatiivisiin muutoksiin ja glomerulusten tulehdukseen, proteinuriaan ja hematuriaan.
Nämä ag-ac-kompleksit laskeutuvat glomerulukseen ja aktivoivat komplementin kaskadin, johtaen glomerulaarisiin endoteelivaurioihin. Tästä syystä sitä pidetään autoimmuunisairautena, koska yksilön immuunijärjestelmä vaurioittaa omia kudoksia.
Antistreptolysiini O -vasta-aineet ovat erittäin korkeita ja komplementin tasot ovat alhaiset.
Viitteet
- Wiener Laboratories. ASO-lateksi. 2000. Saatavissa osoitteessa: wiener-lab.com.ar
- Wikipedian avustajat. "Anti-streptolysiini O." Wikipedia, ilmainen tietosanakirja. Wikipedia, Vapaa tietosanakirja, 23. tammikuuta 2019. Verkko. 19. heinäkuuta 2019.
- Kotby A, Habeeb N, Ezz S. Antistreptolysin O-tiitteri terveydessä ja sairauksissa: tasot ja merkitys. Pediatr Rep. 2012; 4 (1): e8. Saatavana: ncbi.nlm.nih
- Sen E, Ramanan A. Antistreptolysin O -tiitterin käyttö. Arch Dis lasten koulutuskäytäntö, toim. 2014; 99 (6): 231-8. Saatavana: ncbi.nlm.nih
- Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinen diagnoosi. (5. painos). Argentiina, Toimitus Panamericana SA
- González M, González N. 2011. Lääketieteellisen mikrobiologian opas. 2. painos, Venezuela: Carabobon yliopiston tiedotusvälineiden ja julkaisujen osasto.
