BAKTERIOLOGINEN SILMUKKA: OMINAISUUDET, TYYPIT, KÄYTÖT - BIOLOGIA - 2026

Bakteriologinen silmukka on toimiva väline, jota mikrobiologien varten kylvämisen Mikrobiviljelmien (bakteerit tai sienet). Se on ehkä väline, jota nämä ammattilaiset käyttävät eniten.

Sen käyttö vaikuttaa yksinkertaiselta, mutta todellisuudessa se vaatii paljon koulutusta. Ennen kylvön aloittamista, silmukka on steriloitava Bunsen-polttimessa, minkä jälkeen otetaan mikrobinen siirros, joka voi tulla nestemäisestä viljelystä tai kiinteästä viljelmästä.

Bakteriologisten silmukoiden tyypit. Lähde: Koneella luettavaa kirjailijaa ei toimitettu. ば や お oletettu (perustuu tekijänoikeusvaatimuksiin).

Kun inokulaatti on otettu, se voidaan levittää nestemäiseen väliaineeseen tai kylvää kiinteään väliaineeseen. Jokaisen toimenpiteen jälkeen silmukka steriloidaan uudelleen. Kahva soveltuu myös mikrobien määrien valmistamiseen objektilasille.

Bakteriologisella silmukalla on monia nimiä, mukaan lukien: platina- tai silmukka, inokulaatiosilmukka tai siemensilmukka, mutta sen oikea nimi on Kohle-silmukka.

Materiaali, jolla kahva on valmistettu, on yleensä nikkeli-kromi (nikromi) seos tai platina. Toinen markkinoilla saatavilla oleva lajike on muoviset kertakäyttöiset bakteriologiset silmukat.

Toisaalta on olemassa erityyppisiä bakteriologisia silmukoita, joista kukin suorittaa tehtävän mikrobiologin suorittamien tehtävien puitteissa. Kahvan valinta riippuu siitä, mitä on tehtävä.

Esimerkiksi striatumin suorittamiseksi ehtymisellä mikro-organismin eristämiseksi käytetään platinaa, joka päättyy suljettuun renkaaseen riippumatta siitä, kalibroidaanko se vai ei.

Virtsanäytteen kylvöksi on tärkeätä käyttää kalibroitua silmukkaa, kun on tärkeää määrittää CFU: t. Samoin neula-silmukka on välttämätöntä inokuloida biokemialliset testit, jotka on tarpeen kylvää puhkaisulla. On tärkeää, että kahvaa käsittelee koulutettu henkilöstö.

ominaisuudet

Bakteriologiset silmukat koostuvat kahdesta ääripäästä. Toinen pää vastaa kahvaa tai alustaa, kun taas toinen on itse kahva.

Kahva alusta tai kahva

Pohja on tarkoitettu kahvan tarttumiseen käsittelyn aikana. Se on yleensä metallia, mutta siinä on lämpöeriste, joka estää käyttäjää palamasta, kun kahvan kärki steriloidaan sytyttimelle. Sen pituus on noin 20 cm, vaikka se voi olla pidempi. Siinä on lanka kahvan säätämiseksi.

Käsitellä

Se on toiminnallinen pää, ts. Se osa, joka joutuu kosketukseen mikro-organismien ja elatusaineiden kanssa. Se koostuu hienosta lanka, joka työnnetään pohjaan.

Kahva voi olla valmistettu nikromista tai platinasta, minkä vuoksi sitä kutsutaan joskus platinakahvaksi. Se on noin 6,5 cm pitkä ja sen halkaisija on noin 0,20 mm. Kahva kahvan kanssa voi olla 26,5 cm. Mittaukset voivat vaihdella valmistajalta.

Tyypit

Bakteriologisia silmukoita on useita tyyppejä, ja jokaisella niistä on erityinen käyttö. Kahvatyypit ovat seuraavat: kalibroitu rengasmainen kahva, kalibroimaton rengasmainen kahva, suora tai neulakahva, spaattiokahva, L-muotoinen kahva ja terävä kärki.

Toisaalta kahvat voivat olla pysyviä tai kertakäyttöisiä. Pysyvään käyttöön steriloidaan sytyttimessä, ne ovat uudelleenkäytettäviä ja erittäin kestäviä. Vaikka kertakäyttöiset tuotteet ovat steriilejä tehtaalta, niitä käytetään vain kerran ja heitetään pois.

Sovellukset

Rengaskahva, ei kalibroitu

Se on mikrobiologian laboratoriossa eniten käytetty kahva. Sitä käytetään inokulaation mikrobisuspensioon (nestemäinen väliaine) tai osaan pesäkkeeseen (kiinteä alusta) istuttamiseen toiseen viljelyelatusaineeseen, joko biokemiallinen testi tai rikastetumpi tai selektiivisempi väliaine tapauskohtaisesti. Se on hyödyllinen myös valmistettaessa mikroskooppimääriä objektilasille.

Tämän tyyppisellä silmukalla alkuperäinen siirros voidaan raidalla. Se on myös suunniteltu siten, että se liukuu sujuvasti agarille vaurioittamatta sitä. Tietenkin tämä vaatii koulutettua henkilökuntaa käsittelemään kylvötekniikkaa ja käyttämään oikeaa voimaa ja liikkeitä hyvän säteen saamiseksi.

Tällä kahvalla voidaan suorittaa erilaisia ​​kylvötekniikoita. Esimerkki, Petri-maljoissa olevat kiinteät väliaineet siementetään yleensä loppuunmenetyksellä (tekniikoita on useita, katso video 1).

Tämän tekniikan tarkoituksena on saada eristettyjä pesäkkeitä niiden tutkimiseksi ja tunnistamiseksi, etenkin kun näyte on polimikrobista, ts. Viljelmä ei ole puhdasta (se sisältää useampaa kuin yhtä mikro-organismin tyyppiä).

Sen sijaan kiilat istutetaan yksinkertaiseen siksakiin bakteerimassan saamiseksi, mikä ei ole tässä tapauksessa välttämätöntä pesäkkeiden eristämiseksi.

Joskus niitä käytetään myös ottamaan tiettyjä näytteitä. Esimerkiksi Rojas ym. Käyttivät bakteriologista silmukkaa kerättyjen emättimen kudosnäytteiden ottamiseksi rotista.

Bakteriologinen silmukka rengaskärjellä, ei kalibroitu. Lähde: Pixinio.com

Rengasmainen kahva, kalibroitu

Tämä kahva, kuten nimensä osoittaa, on kalibroitu ottamaan tietty määrä mikrobisuspensiota. Sitä käytetään, kun siirrosteen on välttämätöntä noudattaa alalla standardisoitua.

Esimerkiksi, se on hyvin yleistä virtsiviljelmien istuttamisessa. Tässä tapauksessa voidaan käyttää 0,01 ml ja 0,001 ml kalibroitua silmukkaa.

Olisi huomattava, että kalibroiduissa kahvoissa on virhe, joka vaihtelee näytteen ottamiskulman ja säiliön suun koon mukaan.

Jos 0,001 ml: n silmukka työnnetään pystysuoraan säiliöön, jolla on pieni suu (≤ 7 mm), otettu määrä on 50% haluttua pienempi.

Tämä johtuu siitä, että mitä pienempi on säiliön suuhalkaisija, sitä suurempi pintajännitys ja sen vuoksi (lasi - neste) väliset tartuntavoimat kasvavat. Tämä vähentää kahvan ottamaa nestevarausta.

Ottaa huomioon, että jos se otetaan 45 ° kulmassa säiliössä, jolla on leveä suu (≥ 22 mm), se voi kerätä 150% enemmän kuin vaaditaan. Tässä tapauksessa pintajännitys on pienempi ja lasi / muovi-koheesiovoimat vähenevät, kun taas neste-neste-koheesiovoima kasvaa.

Edellä esitetyn vuoksi muut menetelmät pesäkettä muodostavien yksiköiden kvantifioimiseksi ovat joskus edullisia virtsaviljelmille.

Suora tai neulakahva

Sitä kutsutaan myös lankakahvaksi. Sitä käytetään inokuloimaan tiettyjä biokemiallisia testejä, varsinkin niitä, jotka on siemennettävä puhkaisutekniikalla. Esimerkki, puolikiinteät väliaineet, jotka on valmistettu lohkon muodossa, kuten: SIM, MIO ja O / F-väliaine.

Lisäksi liikkuvuutta arvioivien MIO: n ja SIM: n tapauksessa on välttämätöntä, että puhkaisu suoritetaan neulan silmukalla, koska positiivisen liikkuvuuden tulkinta tapahtuu, kun bakteerit kasvavat kohti alkuperäisen siirroksen puolia.

Silmukkasilmukalla inokuloitu testi voi väärentää tuloksia (väärä positiivinen). Tästä syystä tämän tyyppisissä kylvöissä on huolehdittava siitä, että puhkaisu on ainutlaatuinen ja että kun se poistetaan, se tulee ulos samaan suuntaan kuin se tuli.

Toinen testi, joka on neula kylvö, vaikka se on valmistettu kiilamaiseksi, on Kligler. Tässä testissä ei suositella, että happi tunkeutuu syvälle agariin, koska tietyissä kemiallisissa reaktioissa tapahtuu happea sisältämätöntä väliainetta. Tätä kahvaa käytetään myös koskettamaan tiettyä pesäkettä aliviljelyä varten.

Lastukahva

Suurin osa mikro-organismeista antaa pehmeitä, helposti irtoavia pesäkkeitä. On kuitenkin joitain mikrobiaineita, joiden pesäkkeet ovat kovia ja kuivia, esimerkiksi mykobakteerit yleensä ja jotkut sienet. Näissä tapauksissa on hyödyllistä käyttää lastalla olevaa kahvaa.

L-muotoinen kahva

Sitä käytetään yleisimmin sieniviljelmien, erityisesti homeiden, soittamiseen.

Terävä kärjen kahva

Se on hyödyllinen otettaessa hyvin pieniä pesäkkeitä, jotka ovat läsnä monimikrobisissa viljelmissä, jotta ne voisivat aliviljellä.

Kylvökoneet

Video 1

Platinakahvan sterilointi

Kahva on steriloitava ennen ja jälkeen käytön. Bakteriologisen silmukan steriloimiseksi sytyttimessä suoritetaan seuraavasti: Kahva tulee asettaa liekin yläosaan asettamalla se mahdollisimman pystysuoraan asentoon siten, että se steriloidaan kärjestä ylöspäin.

Kun hieno filamentti muuttuu kirkkaan punaiseksi, sen voidaan sanoa olevan steriili. Sen käyttämiseksi se jäähdytetään ja valittu näyte otetaan. (Katso video 2).

Bakteriologisen silmukan sterilointi

Video 2

Viitteet

1. "Bakteriologinen silmukka" Wikipedia, Vapaa tietosanakirja. 23. heinäkuuta 2019, 13:31 UTC. 18. elokuuta 2019, 22:45. Wikipedia.
2. Herrera D, López P, Duque J, Pérez L, Golding R, Hernández C. Kalibroidut metallikahvat mikrobiologeille: Vaihtoehto kansalliselle valmistukselle. Tule. Microbiol. 2010; 30 (1): 37 - 42. Saatavana osoitteessa: ve.scielo.org
3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott: n mikrobiologinen diagnoosi. 12 toim. Toimituksellinen Panamericana SA Argentina.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinen diagnoosi. 5. toim. Toimituksellinen Panamericana SA Argentina.
5. Rojas A, Pardo-Novoa J, Río R, Gómez-Hurtado M, Limón D, Luna F, et ai. Eupatorium arsenei -kukkien heksaaniuutteen kipua lievittävän vaikutuksen määrittäminen akuutin kivun mallissa rotilla. mex. tiedettä. maatila. 2015; 46 (1): 64 - 69. Saatavana osoitteessa: scielo.org