LAKOFENOLISINISET: OMINAISUUDET, KOOSTUMUS, VALMISTELU, KÄYTTÖ - KEMIA - 2026

Laktofenolin sininen tai sininen puuvilla on valmistettu yhden väriaineen ominaisuuksia. Sitä käytetään kliinisissä laboratorioissa pääasiassa sienirakenteiden, kuten hyphae-, ituputkien ja itiöiden, värjäämiseen.

Se auttaa tiettyjen sienien oletus- tai alustavassa diagnoosissa, mutta on kuitenkin aina suositeltavaa vahvistaa diagnoosia spesifisillä testeillä, kuten biokemiallisilla tai serologisilla testeillä.

Laktofenolisinisen värjäyksen graafinen esitys, laktofenolisinisellä värjätty särmä, mikroskooppiin kiinnitetty valmiste. Lähde: public Domain Pictures.net/https://www.youtube.com/watch?v=P-kiFFZ7NvU /https://www.youtube.com/watch?v=wSZ77T5L6e8

Lakofenolisiniset koostuvat maitohaposta, anilinisinisestä, glyserolista, fenolista ja deionisoidusta vedestä. Se voidaan valmistaa laboratoriossa tai sen voi ostaa käyttövalmiina. Valmistettuaan se on käyttövalmis, sitä ei missään tapauksessa pidä laimentaa, koska tämä toimenpide antaa kauheita tuloksia.

Sen komponenttien konsentraatio tekee siitä ihanteellisen sienirakenteiden värjäämiseen, koska fenoli eliminoi mukanaan tulevan bakteerien mikrobiootan, kun taas maitohappo muodostaa suojakalvon sienirakenteen ympärille. Lopuksi, anilinisinisellä on affiniteetti tarttua sienen rakenteisiin.

Perusta

Lakto- fenolisinisellä, suoritetaan yksinkertainen tietyn mykologisen kulttuurin sienirakenteiden värjäys. Sitä kutsutaan yksinkertaiseksi, koska se käyttää vain yhtä väriainetta.

Laktophenolisininen, värjäämisen lisäksi, toimii myös näytteen selkeyttimenä maitohapon ja fenolin yhteistoiminnan ansiosta. Lisäksi fenoli käyttäytyy peittävänä aineena ja estää samalla mikro-organismin hajoamista estämällä hydrolyyttisiä entsyymejä, jotka voi olla läsnä.

Maitohappo säilyttää sienen rakenteiden morfologian.

Toisaalta aniliininisinisellä on ominaisuus tarttua kiiniä sisältäviin rakenteisiin tai sitoutua niihin. Rakenteet värjätään vaaleansinisellä.

On huomattava, että sienimikro-organismien, erityisesti muottien, soluseinämä sisältää kitiinin, minkä vuoksi tämä väriaine on ihanteellinen näiden mikro-organismien värjäämiseen.

ominaisuudet

Laktophenolisininen liuos on voimakkaasti hapan, lievästi samea vesipitoinen väriaine, jonka väri on vaaleansininen. Se pysyy vakaana, jos sitä säilytetään 15-25 ° C: n lämpötilassa. Pullo on pidettävä kunnolla kiinni. Se on ärsyttävä ja syövyttävä iholle ja limakalvoille.

Sävellys

Kaava litran laktofenolisinisen valmistamiseksi on seuraava:

-250 g / l maitohappoa

-1,0 g / l aniliinin sinistä tai metyylisinistä

-500 g / l glyseriiniä

-250 g / l fenolia

-250 ml deionisoitua tai tislattua vettä.

Fenoli liuotetaan aiemmin lämmitettyyn veteen. Maitohappoa ja glyseriiniä lisätään ja sekoitetaan hyvin. Lopuksi aniliinin sininen liukenee. Se sekoittuu jälleen ja on käyttövalmis.

80 ml: n laktofenolisinisen liuoksen valmisteluosat ovat:

-20 g fenolikiteitä

-20 ml maitohappoa

-40 ml glyseriiniä tai glyserolia

-20 ml tislattua vettä.

Käyttää

Sitä käytetään sienirakenteiden värjäämiseen ja mikroskooppisella tasolla havaittujen morfologisten ominaisuuksien avulla kyetäkseen tekemään oletettu diagnoosi sienestä.

Prosessi

Kulttuurien sienirakenteiden värjääminen

- Otetaan puhdas sieni-viljelmä, jonka rakenteita on tarkkailtava.

- työskentele mieluiten laminaarivirtauskupuissa tai sytyttimessä, naamarin ja käsineiden avulla, koska on välttämätöntä noudattaa bioturvallisuusstandardeja, koska useimmat muotit ovat helposti leviäviä ympäristössä ja edustavat siksi vaaraa operaattorille.

- Pisara laktofenolisinistä asetetaan objektilasille.

- Leikkaa pieni neliö hyvälaatuista teippiä ja kiinnitä se erittäin huolellisesti kylmästeriloidun platinakahvan loppuun.

- Platinakahvaa lähestytään sienipesäkkeen pinnallisinta osaa ja kulttuuria kosketaan erittäin huolellisesti, tarkalleen missä teippi sijaitsee.

- Sitten se siirretään objektilasille ja asetetaan suoraan laktofenolisinisen pisaran puolelle huolehtimalla siitä, että teippi on täydellisesti pidennetty ja voideltu väriaineella. Platinakahva poistetaan erittäin herkästi.

- Nauhalle laitetaan uusi tippa laktofenolisinistä ja päälle kansi. Älä kohdista liikaa paineita, jotta sienen rakenteet eivät tuhoudu, koska ne ovat erittäin herkkiä. Väriaineen tulisi antaa toimia noin 3 - 4 minuuttia.

- Tämän ajan kuluttua valmiste on valmis tarkkailtavaksi mikroskoopilla 10X tai 40X suurennuksella. Jos tarve on 100X, on käytettävä upotusöljyä.

- Sienen rakenteet värjätään yleensä sinisellä värillä, lukuun ottamatta hedelmättömiä sieniä, jotka säilyttävät tämän tyyppiselle sienelle tyypillisen ruskean värinsä.

Biologisen näytteen suora värjäys

Jos vaaditaan tutkimaan suoraa biologista näytettä, kuten ysköstä, mätätautiä, eritteitä, erittymiä, näillä on oltava etukäteen tehtävä menetelmä näytteen puhdistamiseksi. NaOH-liuosta käytetään tähän.

Hiusnäytteiden tapauksessa ne voidaan värjätä suoraan.

Useat kärsineet karvat (yhteensä 10) otetaan oletettavista tinea capitis -vaurioista (hiustenlähtöalueet) ja asetetaan diaan (3 - 4 karvaa per dia). Muutama tippa laktofenolisinistä asetetaan päälle ja peitetään heti kansilevyllä.

Tartu dioihin pihdillä ja kuumenna varovasti polttimen yli. Tee tämä suorittamalla 3 - 4 nopeaa liekin läpi. Tarkkaile mikroskooppia 40X: n lämpötilassa ja etsi itiöt hiuksen ulkopuolella tai sisällä (vastaavasti ectothrix tai endothrix). Lisää tarvittaessa upotusöljyä ja seuraa 100X.

Suoliputken värjäys

Sen jälkeen kun oletettua Candida albicans -viljelmää on inkuboitu ihmisen seerumissa 2 - 4 tuntia 37 ° C: ssa, otetaan osa liuosta ja värjätään laktofenolisinisellä. Valmistetta tarkkaillaan mikroskoopilla 40X: ssä. Kudosputki on läsnä ja blastosporit värjäävät kirkkaansinisiltä.

Laktophenolin käyttöturvallisuustiedote

Kansallinen palontorjuntayhdistys ry (NFPA) laatii kemiallisten aineiden käyttöturvallisuustiedot sen näkökulmasta, jota se edustaa eri näkökohtien perusteella. Näitä symboloi värillinen roma ja luku vaihtelee välillä 0- neljä.

Terveysvaarat yksilöidään sinisellä, syttyvyys punaisella, epävakaus tai reaktiivisuus keltaisella ja kaikki erityiset vaarat valkoisella.

terveys

NFPA: n mukaan laktofenolisinisen aiheuttama terveysriski on taso 3. Tämä tarkoittaa, että aine on erittäin vaarallinen nieltynä tai suorassa kosketuksessa ihon tai limakalvojen kanssa.

Se on erittäin syövyttävä ja ärsyttävä aine.

Kosketuksessa ihon ja limakalvojen kanssa se aiheuttaa vakavia palovammoja.

Nieleminen voi aiheuttaa päänsärkyä, sekavuutta, uneliaisuutta, tajuttomuutta, hengityksen pysähtymistä ja jopa kuoleman.

Syttyvyys

NFPA: n mukaan Lactophenol Blue on luokiteltu tasolle 1 syttyvyyden suhteen. Tämä tarkoittaa, että se palaa vain, kun sitä lämmitetään yli 94 ° C.

epävakaisuus

Listattu NFPA: n mukaan tasolla 0 (nolla) reaktiivisuuden suhteen. Tämä tarkoittaa, että sillä ei ole reaktiivisuusriskiä, ​​ts. Se on kemiallisesti vakaa aine.

Erityiset vaarat

Se ei tarjoa ylimääräisiä erityisiä vaaroja.

Viitteet

1. SAR-laboratorio. Laktophenolsininen. 2010. Saatavana osoitteessa: labsar.com.
2. Sovellettu kliinisen kemian laboratorio. Laktophenol sininen. 2015.Saatavilla osoitteessa: cromakit.es
3. Merck Laboratories. Laktophenolisininen mikroskopia liuoksessa. 2017.Saatavilla osoitteessa: Käyttäjät / Equipo / Lataukset
4. Hätäkortti. Laktophenolisininen liuos sienien värjäykseen. Universidad Pontificia Javeriana, Bogotá Kolumbia. 2014. Saatavissa osoitteessa: javeriana.edu.co
5. González M, Diamont D, Gutiérrez B. Sienirakenteiden värjäysmenetelmä kasvisvärillä saastuttamattomana vaihtoehtona. Bioagro, 2011; 23 (1): 65 - 68. Saatavana osoitteessa: Redalyc.
6. Laboratorio Himedia. Laktophenol puuvilla sininen. 2017. Saatavana osoitteesta: himedialabs.com
7. Wanger A, Chavez V, Huang R, Wahed A, näyttelijä J, Dasgupta A. Biokemialliset testit ja värjäystekniikat mikrobien tunnistamiseen. Science Direct, 2017; 61-73. Saatavana: Elsevier