NEPHELOMETRIA: MISTÄ SE KOOSTUU JA SOVELLUKSET - KEMIA - 2025

Nefelometria Menetelmässä mitataan säteilyn aiheuttaman hiukkasten (liuoksena tai suspensiona) ja tehon mittaamiseksi sironneen säteilyn kulmassa suuntaan tulevan säteilyn.

Kun ripustettu hiukkanen osuu valonsäteeseen, osa valosta heijastuu, toinen osa absorboituu, toinen taipuu ja loput lähetetään. Siksi, kun valo osuu läpinäkyvään väliaineeseen, jossa on kiinteiden hiukkasten suspensio, suspensio näyttää samealta.

Mikä on nephelometria?

Hiukkasten aiheuttama säteilyn hajonta liuoksessa

Sillä hetkellä, kun valonsäde osuu suspendoituneen aineen hiukkasiin, säteen etenemissuunta muuttaa suuntaansa. Tämä vaikutus riippuu seuraavista:

1.Partikkelin mitat (koko ja muoto).

2. Suspension ominaisuudet (pitoisuus).

3.Valonpituus ja -voimakkuus.

4.Tämättömän valon etäisyys.

5. Tunnistuskulma.

6. Väliaineen taitekerroin.

Nephelometer

Nefelometri on väline, jolla mitataan suspendoituneet hiukkaset nestemäisessä näytteessä tai kaasussa. Siten valokenno, joka on sijoitettu 90 ° kulmaan valonlähteen kanssa, havaitsee suspensiossa olevien hiukkasten säteilyn.

Samoin hiukkasten heijastama valo valokennoa kohti riippuu hiukkasten tiheydestä. Kaaviossa 1 esitetään nepelometrin muodostavat peruskomponentit:

Kuva 1. Nefelometrin peruskomponentit.

TO.

Nefelometriassa on elintärkeää saada säteilylähde, jolla on korkea valonlähtö. Niitä on erilaisia, muun muassa ksenonlampuista ja elohopeahöyrylampuista, volframihalogeenilampuista, lasersäteilystä.

B.

Tämä järjestelmä sijaitsee säteilylähteen ja kyvetin välissä, joten tällä tavalla kyvetissä vältetään säteily, jolla on eri aallonpituudet haluttuun säteilyyn verrattuna.

Muutoin fluoresenssireaktiot tai kuumennusvaikutukset liuoksessa aiheuttaisivat mittauspoikkeamia.

C.

Se on yleensä prisma tai lieriömäinen säiliö, ja sillä voi olla erikokoisia. Tässä on tutkittava ratkaisu.

D.

Ilmaisin sijaitsee tietyllä etäisyydellä (yleensä hyvin lähellä kyvettiä) ja on vastuussa suspensiossa olevien hiukkasten hajottaman säteilyn havaitsemisesta.

JA.

Yleensä se on elektroninen kone, joka vastaanottaa, muuntaa ja käsittelee tietoja, jotka ovat tässä tapauksessa suoritetusta tutkimuksesta saatuja mittauksia.

poikkeamat

Jokaiseen mittaukseen liittyy virheprosentti, joka annetaan pääasiassa:

Saastuneet kyvetit: kyveteissä mikä tahansa tutkimuksen kohteena olevan liuoksen ulkopuolella oleva aine, joko kyvetin sisällä tai ulkopuolella, vähentää säteilyvaloa matkalla ilmaisimeen (vialliset kyvetit, kyvetin seiniin tarttuva pöly).

Häiriöt: Mikrobisen epäpuhtauden esiintyminen tai sameus hajottaa säteilyenergian, lisäämällä dispersion voimakkuutta.

Fluoresoivat yhdisteet: nämä ovat yhdisteitä, jotka saapuessaan säteilyltä kiihotettaessa aiheuttavat virheellisiä ja korkean sirontatiheyden lukemia.

Reagenssien varastointi: Riittämätön järjestelmän lämpötila voi aiheuttaa epäsuotuisia tutkimusolosuhteita ja saattaa johtaa sameisiin tai saostuneisiin reagensseihin.

Sähkövirran vaihtelut: Jotta tasapainoinen säteily ei aiheutuisi virheen lähteeksi, suositellaan jännitestabilisaattoreita tasaiseksi säteilyksi.

Metrologiset ominaisuudet

Koska havaitun säteilyn säteilyteho on suoraan verrannollinen hiukkasten massakonsentraatioon, nephelometrisillä tutkimuksilla on teoriassa suurempi metrologinen herkkyys kuin muilla vastaavilla menetelmillä (kuten turbidimetria).

Lisäksi tämä tekniikka vaatii laimeita ratkaisuja. Tämä mahdollistaa sekä imeytymis- että heijastusilmiöiden minimoinnin.

Sovellukset

Nephelometrisillä tutkimuksilla on erittäin tärkeä asema kliinisissä laboratorioissa. Sovellukset vaihtelevat immunoglobuliinien ja akuutin faasin proteiinien määrittämisestä, komplementista ja hyytymisestä.

Immuunikompleksin havaitseminen

Kun biologinen näyte sisältää kiinnostuksen kohteena olevan antigeenin, se sekoitetaan (puskuriliuoksessa) vasta-aineen kanssa immuunikompleksin muodostamiseksi.

Nephelometria mittaa valon määrän, joka hajottaa antigeeni-vasta-ainereaktion (Ag-Ac) avulla, ja tällä tavalla havaitaan immuunikomplekseja.

Tämä tutkimus voidaan suorittaa kahdella menetelmällä:

Päätepiste-nephelometria:

Tätä tekniikkaa voidaan käyttää päätepisteanalyysiin, jossa tutkitun biologisen näytteen vasta-ainetta inkuboidaan 24 tuntia.

Ag-Ac-kompleksi mitataan nephelometrillä ja sironneen valon määrää verrataan samaan mittaukseen, joka suoritettiin ennen kompleksin muodostumista.

Kineettinen nephelometria

Tässä menetelmässä kompleksinmuodostuksen nopeutta tarkkaillaan jatkuvasti. Reaktionopeus riippuu näytteen antigeenipitoisuudesta. Tässä mittaukset otetaan ajan funktiona, joten ensimmäinen mittaus suoritetaan hetkellä "nolla" (t = 0).

Kineettinen nephelometria on yleisimmin käytetty tekniikka, koska tutkimus voidaan suorittaa yhdessä tunnissa verrattuna loppupistemenetelmän pitkään aikaan. Dispersiosuhde mitataan heti reagenssin lisäämisen jälkeen.

Siksi niin kauan kuin reagenssi on vakio, läsnä olevan antigeenin määrän katsotaan olevan suoraan verrannollinen muutosnopeuteen.

Muut sovellukset

Nefelometriaa käytetään yleensä veden kemiallisessa laadun analysoinnissa, kirkkauden määrittämiseksi ja sen käsittelyprosessien hallitsemiseksi.

Sitä käytetään myös mittaamaan ilman pilaantumista, jossa hiukkasten pitoisuus määritetään niiden tuottamasta dispersiosta tulevassa valossa.

Viitteet

1. Britannica, E. (toinen). Nephelometria ja sameusmittaus. Palautettu osoitteesta britannica.com
2. Al-Saleh, M. (toinen). Turbidimetria ja nephelometria. Haettu osoitteesta pdfs.semanticscholar.org
3. Bangs Laboratories, Inc. (toinen). Palautettu osoitteesta technochemical.com
4. Morais, IV (2006). Turbidimetrinen ja nephelometrinen virtausanalyysi. Saatu arkistosta.ucp.p
5. Sasson, S. (2014). Nefelometrian ja turbidimetrian periaatteet. Palautettu osoitteesta notesonimmunology.files.wordpress.com
6. Stanley, J. (2002). Immunologian ja serologian perusteet. Albany, NY: Thompson Learning. Saatu osoitteesta books.google.co.ve
7. Wikipedia. (SF). Nefelometria (lääke). Palautettu osoitteesta en.wikipedia.org