- ABO-konserni
- Luonnolliset vasta-aineet
- Veriryhmään liittyvät antigeenit ja vasta-aineet
- ABO-ryhmän yhteensopimattomuus
- Vähäiset antigeenit
- Risti immuniteetti
- Mikä on ristikkäytys?
- Perusta
- Ristireaktioiden tyypit
- Suurin ristiin sopivuus
- Pieni ristikkäin
- vaiheissa
- Tekniikka
- Suolaliuos
- Terminen vaihe
- Coombs-vaihe
- Viitteet
Crossmatch monia laboratoriotutkimukset tehdään onko verituotteiden luovuttajalta (lähinnä veren ja pakattu globulaarisia) ovat yhteensopivia vastaanottajan veren.
Se on täydentävä testi ABO-yhteensopivuuden ja Rh-tekijän suhteen. Syynä ristikkäytymiseen on, että joskus kahdella henkilöllä (luovuttaja-vastaanottaja) voi olla sama ABO- ja Rh-ryhmä, mutta silti heidän verensä ei sovi yhteen.

Lähde: unsplash.com
Tällainen yhteensopimattomuus johtuu vasta-aineiden esiintymisestä sarjasta punasolujen proteiineja, jotka tunnetaan pieninä antigeeneinä. Näitä antigeenejä ei testata rutiininomaisesti, koska ne ovat veriryhmän (ABO) ja Rh-tekijän suhteen.
Tämä johtuu siitä, että pienet antigeenit ovat paljon harvemmin esiintyviä ja niillä on vaihteleva ilmentyminen jokaisessa yksilössä, siksi on käytännössä mahdotonta ryhmitellä niitä luokkiin, kuten tehdään ryhmä- ja Rh-tekijän kanssa.
Sen sijaan luovuttajien punaiset verisolut sekoitetaan potilaan seerumiin (pääosastotesti) ja potilaan punasoluihin luovuttajan seerumiin (pieni vastaavuustesti) antigeeni-vasta-ainereaktioiden havaitsemiseksi.
Kun joko potilaan tai luovuttajan seerumissa on vasta-aineita vähäisiin antigeeneihin, testin sanotaan olevan positiivinen, joten useimmissa tapauksissa tiettyä veren yksikköä ei voida siirtää.
ABO-konserni
Jotta ymmärrät täysin ristireaktioita, sinun on ensin tiedettävä veriryhmien perusteet.
Tässä mielessä tärkein asia on tietää, että veri voidaan luokitella neljään ryhmään: A, B, AB ja O.
Jokainen näistä ryhmistä ekspressoi tiettyä proteiinia (antigeeniä) punasolujen pinnalla, jonka eri ryhmän potentiaalisen reseptorin vasta-aineet tunnistaa vieraana elementtinä.
Silmiinpistävin asia antigeeni-vasta-ainereaktioissa veren sovittamisessa on, että vasta-aineiden olemassaololle ei vaadita aikaisempaa altistumista antigeenille. Tätä kutsutaan luonnollisiksi vasta-aineiksi.
Luonnolliset vasta-aineet
Yleensä, jotta vasta-aineita voisi esiintyä yksilön kehossa, on välttämätöntä, että yksilön valkosolut on aiemmin altistettu antigeenille.
Tämä tarkoittaa, että vieraan antigeenin ja organismin välisessä ensimmäisessä kosketuksessa ei ole vasta-aineita, koska ne syntyy myöhemmin, ensimmäisen kosketuksen jälkeen. Siksi immuunijärjestelmällä on mahdotonta olla vasta-aineita esimerkiksi tiettyä virusta vastaan, ellei sitä ole aiemmin altistettu sille.
Ainoa poikkeus yllä oleviin ovat anti-AB-antigeenit. Näissä tapauksissa henkilöllä on vasta-aineita antigeeniä vastaan, joita heidän punaisissa verisoluissaan ei ole, vaikka he eivät ole koskaan olleet kosketuksissa toisen henkilön punasoluihin. Tätä kutsutaan luonnollisiksi vasta-aineiksi.
Veriryhmään liittyvät antigeenit ja vasta-aineet
Veriryhmät määritetään ABO-järjestelmän tapauksessa spesifisten antigeenien (A tai B) läsnä ollessa punasolujen kalvolla ja sitä vastoin vasta-aineilla puuttuvaa antigeeniä vastaan punasolujen kalvolla.
Siten henkilö, jolla on veriryhmä A, ekspressoi antigeenia A punasolujensa pinnalla, kun taas seerumissa on anti-B-vasta-aineita.
Päinvastoin, ryhmän B potilailla B-antigeeni löytyy, kun taas vasta-aineet ovat anti-A: ta.
Potilailla, joilla on AB-verta, on kuitenkin sekä A- että B-antigeenejä, joten vasta-aineita ei ole, koska niin tekeminen tuhoaisi henkilön punasolut.
Aivan päinvastoin tapahtuu ryhmässä O, jossa punasolujen kalvossa ei ole mitään kahdesta antigeenistä (ei A eikä B), kun taas seerumissa on anti-A- ja anti-B-vasta-aineita.
ABO-ryhmän yhteensopimattomuus
Edellä esitetystä ABO-veriryhmien yhteensopivuus voidaan helposti päätellä, koska tuntemalla punasolujen kalvon antigeeni, seerumin vasta-aineet tunnistetaan automaattisesti. Jotta:
- Veri A on yhteensopiva ryhmän A ja ryhmän O kanssa.
- Veriryhmä B on yhteensopiva verien B ja O kanssa.
- I-ryhmän ihmiset voivat saada vain O-verta (koska heillä on anti-A- ja anti-B-vasta-aineita), vaikka kaikki muut ryhmät vastaanottavat heidän verensä ilman ongelmia, koska siinä ei ole antigeenejä.
- Viimeinkin. ne, joilla on veriryhmä AB, voivat vastaanottaa verta kaikista muista ryhmistä (A, B, O ja tietysti AB), koska heillä ei ole vasta-aineita mitään antigeenejä vastaan. Kuitenkin vain AB-ryhmän ihmiset voivat vastaanottaa AB-verta, koska kaikilla muilla ryhmillä on vasta-aineita, jotka tuhoavat nämä punasolut.
Vähäiset antigeenit
Kuten ABO-ryhmissä, erytrosyyttien pinnalta löytyy sarja proteiineja, jotka toimivat antigeeneinä samalla tavalla kuin ABO-ryhmän antigeenit.
Näitä antigeenejä ei kuitenkaan ole kaikissa yksilöissä. Niiden yhdistelmä on heterogeeninen ja tunkeutuminen (proteiinien ilmentymisen taso) on vaihteleva, joten luokittelu ryhmiin, kuten on olemassa ABO: lle ja Rh: lle, on mahdotonta. Sieltä se saa nimensä "vähäisistä antigeeneistä", tunnetaan myös nimellä "vähäisen esiintymisen antigeenejä".
Vaikka niitä ei ole usein, pieniä antigeenejä vastaan voi olla luonnollisia vasta-aineita. Niistä yleisimpiä ovat Lewis, MNS, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb ja Kidd. Kaikki heistä ovat vastuussa erittäin vakavista hemolyyttisistä ja verensiirron jälkeisistä reaktioista.
Lisäksi saattaa esiintyä herkistymistä pieniä antigeenejä vastaan aikaisemmassa kosketuksessa joko mainittujen antigeeniproteiinien kanssa aikaisempien verensiirtojen tai ristinimmuniteetin takia.
Risti immuniteetti
Sanotaan, että ristiimmuniteetti on, kun kaksi antigeenia kahdesta eri lähteestä (esimerkiksi punasolu ja bakteeri) ovat hyvin samankaltaisia, siihen pisteeseen, että vasta-aineet yhtä näistä antigeeniproteiineista reagoivat myös toisen kanssa, koska ne ovat melkein identtisiä.
Ymmärtääksesi tätä paremmin ottamalla edellinen hypoteettinen esimerkki (punasolujen ja bakteerien antigeenit). Kummassakaan tapauksessa ei ole luonnollisia vasta-aineita, mutta jos henkilö altistuu bakteereille, hän tuottaa vasta-aineita sitä vastaan.
Tällaiset vasta-aineet reagoivat myöhemmin punasolua vastaan, jos sen antigeenit ovat hyvin samanlaisia kuin bakteereilla, jotka indusoivat vasta-aineiden muodostumisen.
Jos näin tapahtuu, punasoluja, joissa on kyseinen antigeeninen proteiini, ei voida antaa henkilölle, jolla on vasta-aineita, koska hylkääminen tapahtuisi. Tässä on ristireaktioiden merkitys.
Mikä on ristikkäytys?
Koska eri yksilöiden verta ei ole mahdollista ryhmitellä pienempiin antigeeneihin perustuen, ainoa tapa tietää, onko jonkin toisen henkilön veressä toisen ihmisen punasolujen vähäisiä antigeenejä vasta-aineita, on ristikkäin sovittaminen..
Niissä tapauksissa, joissa vasta-aineita on läsnä, käynnistyy hemolyysi- tai agglutinaatioreaktio, minkä vuoksi päätellään, että reaktio oli positiivinen; toisin sanoen on olemassa vasta-aineita vähäisiä antigeenejä vastaan (vaikka ei tiedetä tarkalleen kumpi). Muutoin testi on negatiivinen.
Perusta
Ristiinsovitukset perustuvat antigeeni-vasta-ainereaktioon. Siksi heidän kanssaan on mahdollista havaita, onko vastaanottajan seerumissa vasta-aineita luovuttajan punasolujen antigeenejä vastaan (tai päinvastoin), mikä indusoi antigeeni-vasta-ainereaktion.
Jos vasta-aineita ei ole, reaktiota ei tapahdu ja testi ilmoitetaan negatiiviseksi. Päinvastoin, jos reaktio on positiivinen (testin aikana tapahtuu hemolyysi tai agglutinaatio), voidaan päätellä, että vasta-aineita on läsnä.
Tässä mielessä on tärkeää huomata, että sekä luovuttajan että vastaanottajan seerumissa voi olla vasta-aineita punasoluja vastaan. Siksi ristireaktioita on kahta tyyppiä.
Ristireaktioiden tyypit
Luovuttajien punasolujen vasta-aineita voi esiintyä potilaan seerumissa; mutta myös päinvastaista voi tapahtua, ts. vasta-aineita luovuttajan seerumissa potilaan punasoluja vastaan.
Siksi ristiinsovitusta on kahta tyyppiä:
- Suuri ristiin sopivuus.
- Pieni ristikkäin.
Molemmat tyypit suoritetaan rutiininomaisesti veripankissa ennen verituotteiden siirtämistä, koska jos jokin kokeista on positiivinen, on suuri riski verensiirtoreaktioista, jotka voivat vaarantaa potilaan elämän.
Suurin ristiin sopivuus
Tässä testissä arvioidaan, sisältääkö vastaanottajan seerumi vasta-aineita luovuttajan punasoluihin.
Jos näin tapahtuu, verituotteita ei voida antaa, koska suuri määrä potilaan plasmassa olevia vasta-aineita tuhoaa luovuttajan punasolut erittäin nopeasti aiheuttaen katastrofaalisia reaktioita vastaanottajan kehossa prosessissa. Nämä reaktiot ovat niin vakavia, että ne voivat olla hengenvaarallisia.
Pieni ristikkäin
Tässä tapauksessa määritetään, onko luovuttajan seerumissa vasta-aineita vastaanottajan punasoluihin.
Jos näin on, vasta-aineet alkavat tuhota vastaanottajan punasoluja. Koska vasta-aineiden määrä on rajoitettu, reaktio on kuitenkin vähemmän voimakas; vaikka se on edelleen vaarallinen.
vaiheissa
Sekä pää- että pienimuotoinen ristikkäinjako on jaettu kolmeen vaiheeseen:
- suolaliuos.
- Terminen tai inkubaatio.
- Coombs.
Ensimmäisessä vaiheessa punasolut ja seerumi sekoitetaan suolaliuokseen. Seuraavaksi lisätään albumiinia ja näytettä inkuboidaan 37 ° C: ssa 30 minuutin ajan koombifaasin lopulliseksi jatkamiseksi.
Tekniikka
Crossmatch-tekniikka on suhteellisen suoraviivainen, koska siihen sisältyy luovuttajien punaisten verisolujen lisääminen potilaan seerumiin (suuri crossmatch) sekä vastaanottajan erytrosyytit luovuttajaseerumiin (pieni crossmatch).
Antigeeni-vasta-ainereaktion indusoimiseksi suhteellisen lyhyessä ajassa on noudatettava sarjaa standardisoituja vaiheita. Nämä vaiheet on esitetty yhteenvetona yksinkertaisella tavalla alla.
On tärkeää huomata, että seuraavassa osassa kuvataan tärkein yhteensopivuustesti, vaikka vaiheet ovat samat vähäisen yhteensopivuustestin suhteen, mutta vaihtamalla punasolujen ja seerumin alkuperä.
Suolaliuos
- Lisää koeputkeen 2 tippaa seerumia vastaanottajalta (luovuttajalta, jos se on pieni ristikkäin).
- Ota näyte punasoluista luovuttajalta (vastaanottajalta, jos se on pieni ristiinpitoisuus).
- Pese ja sentrifugoi punasolut.
- Suspendoidaan uudelleen liuokseen, joka on välillä 3% - 5%.
- Aseta tippa tätä liuosta putkeen, joka sisältää vastaanottajan seerumin.
- Sekoita varovasti.
- Sentrifugoidaan.
- Lue tulos näyttölampussa.
Terminen vaihe
- Lisää 2 tippaa 22-prosenttista albumiinia putkeen, jossa suolaliuosvaihe oli valmis.
- Inkuboi 37 ° C: ssa 30 minuutin ajan.
- Sentrifugoidaan 15 sekuntia.
- Lue tulos näyttölampussa.
Coombs-vaihe
- Ota solut putkesta ja pese ne suolaliuoksella.
- Poista supernatantti.
- Lisää kaksi tippaa Coombs-reagenssia.
- Sekoita varovasti.
- Sentrifugoidaan 15 - 30 sekuntia.
- Suspendoi solut uudelleen ja arvioi näyttölampussa aglutinaation tai hemolyysin varalta.
Jos jossain vaiheissa tapahtuu aglutinaatio tai hemolyysi, tulosta pidetään positiivisena.
Viitteet
- Hall, TC, Pattenden, C., Hollobone, C., Pollard, C., ja Dennison, AR (2013). Verensiirtopolitiikka valinnaisessa yleiskirurgiassa: kuinka optimoida ristisittelut verensiirtosuhteet. Verensiirtolääketiede ja hemoterapia, 40 (1), 27-31.
- Silvergleid, AJ, Wells, RF, Hafleigh, EB, Korn, G., Kellner, JJ, & Grumet, FC (1978). Yhteensopivuustesti käyttäen 51Chromium-leimattuja punasoluja ristikkäin positiivisilla potilailla. Verensiirto, 18 (1), 8 - 14.
- Kulkarni, N., Ali, M., Haray, PN, Joseph, A., ja Masoud, A. (2006). Elektroninen ristiin sopiva järjestelmä. Tarvitaanko veri säännöllistä esioperatiivista ristitulosta kolorektaaliresektioita varten ?. Endoskopia, 38 (11), juliste_50.
- Heal, JM, Blumberg, N., ja Masel, D. (1987). Arviointi ristikkäytymisestä, HLA: sta ja ABO: sta vastaavuus verihiutaleiden transfuusioissa tulenkestäville potilaille. Blood, 70 (1), 23-30.
- Arslan, Ö. (2006). Elektroninen ristinsovitus. Transfuusiolääketieteen arvostelut, 20 (1), 75-79.
- Wu, KK, Hoak, JC, Koepke, JA ja Thompson, JS (1977). Yhteensopivien verihiutaleiden luovuttajien valinta: kolmen ristiinsovitustekniikan tulevaisuuden arviointi. Transfuusio, 17 (6), 638-643.
- Schonewille, H., Zijl, AMV, ja Wijermans, PW (2003). Matala esiintyvyyden omaavien RBC - antigeenien vasta - aineiden merkitys täydellisessä ja lyhennetyssä ristiinsovituksessa. Transfuusio, 43 (7), 939-944.
