BENGALI RUUSU: PERUSTEET, MENETTELY, LAADUNVALVONTA - LÄÄKE - 2026

Rose Bengal on laboratoriokoe, joka perustuu antigeeni-vasta-ainereaktioon luomistaudin diagnosoimiseksi. Tekniikka mahdollistaa spesifisten vasta-aineiden havaitsemisen Brucella abortus -bakteeria vastaan ​​ihmisen seeruminäytteissä. Tulos voidaan ilmoittaa kvalitatiivisesti tai puolikvantitatiivisesti.

Laadullinen muoto ilmaisee, onko potilas testissä positiivinen vai negatiivinen, ts. Onko vasta-aineita vai ei. Samaan aikaan puolikvantitatiivinen raportti ilmoitetaan IU / ml, ja se osoittaa läsnä olevien vasta-aineiden likimääräisen määrän. On huomattava, että vasta-aineita tuotetaan vain, jos potilas on ollut kosketuksessa mikro-organismin kanssa.

Rose Bengal -reaktio agglutinaatiolevyllä. Lähde: otettu videosta

Suuren yksinkertaisuuden, suuren herkkyyden ja spesifisyyden vuoksi se on yksi seroaglutinaatiotekniikoista, joita käytetään eniten lääketieteessä alkuperäisenä testinä tämän taudin diagnosoinnissa.

Jotkut tutkijat ovat verranneet Rose Bengal -testin tehokkuutta muihin tekniikoihin, kuten seroaglutinaatioon (kuumeiset antigeenit), ja havainneet, että vaikka korrelaatio on hyvä, he näkivät yksittäisiä tapauksia, joissa kuumeisen antigeenin testi oli negatiivinen ja Rose de Positiivinen soihdutus.

Saatu ero johtui siitä, että näillä potilailla oli Brucella abortusta vastaan ​​IgG-vasta-aineiden alaluokka, jolla oli parempi sitoutumiskapasiteetti happamassa pH: ssa, siksi he pystyivät reagoimaan Rose Bengal -reagenssin kanssa, mutta eivät febriilisten antigeenien kanssa.

Tässä mielessä he ovat ehdottaneet, että kuumeisen antigeenitekniikan reagenssit muutetaan happamaksi pH: ksi, jotta ne voivat havaita tämän tyyppiset tapaukset.

Perusta

Rose Bengal -reagenssi koostuu antigeenisuspensiosta. Se koostuu Brucella abortus -kannasta S99, laimennettuna happamaan laktaattipuskuriin (pH 3,6), plus fenolista ja Rose Bengal -väriaineesta.

Siksi näytteessä etsitään anti-Brucella-vasta-aineita, jos niitä on läsnä, ne reagoivat reagenssiantigeenin kanssa ja makroskooppisesti näkyvä agglutinaatioreaktio havaitaan. Testissä havaitaan joko IgM-vasta-aineita tai IgG-vasta-aineita.

Tämä tarkoittaa, että se voi havaita taudin sekä akuutissa vaiheessaan, jossa IgM-vasta-aineet ovat vallitsevia, että sen kroonisessa vaiheessa, jossa IgG-vasta-aineet ovat vallitsevia.

Tämä edustaa etua, koska se lisää testin herkkyyttä, mutta samalla se on haitta, koska se ei erottele toista vaihetta, koska reaktio IgM- ja IgG-vasta-aineiden kanssa on identtinen.

Testi on aina suoritettava yhdessä negatiivisen kontrollin ja positiivisen kontrollin kanssa. Negatiivinen kontrolli sisältää eläinseerumia ilman vasta-aineita ja positiivinen kontrolli sisältää eläinperäistä seerumia, jossa on 50 IU / ml anti-Brucella-vasta-aineita.

Käyttää

Luomistauti on vakava sairaus, jolla on taipumus olla krooninen ja vaarallinen, joten on erittäin tärkeää, että se diagnosoidaan varhaisessa vaiheessa. Se on zoonoosi, ja ihmiset voivat saada tartunnan suoraan kosketuksessa saastuneen materiaalin kanssa, haavoittuvimmat ihmiset ovat eläinlääkärit ja eläintenhoitajat.

Infektio voi tapahtua myös syömällä tartunnan saaneita raa'ita lihaa muun tartunnan muodon lisäksi.

Tämä tauti hyökkää paikallisesti tai systeemisesti. Systeeminen muoto on vakavin, koska siihen voidaan vaikuttaa useisiin elimiin, mukaan lukien retikulumin endoteelijärjestelmä (maksa, perna, luuydin), iho (selluliitti ja lymfadenopatia), hengityselimet (keuhkokuume), tuki- ja liikuntaelimistö (artriitti, sacroiliitis ja spondüliitti).

Rose Bengal -testi on erittäin hyödyllinen tekniikka alkuperäisen seulonnan suorittamiseen, koska se on erittäin edullinen, helppo käyttää ja sillä on suuri spesifisyys ja herkkyys.

Väärien negatiivisten ja väärien positiivisten tapaukset ovat hyvin harvinaisia, ja niitä voi esiintyä ihmisillä, joiden vasta-ainetiitterit ovat erittäin alhaiset (<25 IU / ml) tai erittäin korkeat (> 1000 IU / ml).

Prosessi

tarvikkeet

-Rose Bengal Kit

-Aglutinaatiolevyn valkoinen tausta

-50 ui pipettiä

-Kääntölaite (valinnainen)

-Vortex

Tekniikka (laadullinen menetelmä)

Kaupallisissa Rose Bengal -sarjoissa on käyttövalmiita reagensseja.

-Käytä reagensseja ennen työskentelyn aloittamista.

-Aglutinaatiolevyillä on piirretty ympyrät, jokainen eri näytteelle. Käytä 3 ympyrää, ensimmäinen negatiiviselle kontrollille, toinen näytteelle ja kolmas positiiviselle kontrollelle.

-Aseta tippa tai 50 µl kontrolleja ja näytettä vastaavaan ympyrään.

- Sekoita Rose Bengal -reagenssi vorteksilla. Aseta tippa aikaisemmin sijoitettujen viereen.

-Miksi sekoitetaan puisilla hammastikkuilla (käytä yksi kutakin näytettä tai kontrollia varten). Tee ympyräliikkeitä ja levitä niin, että peität koko ympyrän.

Lähde: Videosta otetut kuvat: https://youtu.be/igAVQ-GiyGY. Muokattu kuvan asettelu.

-Aseta levy automaattiselle pyörijälle nopeudella 80 - 100 rpm tai pyöritä käsin 4 minuutin ajan. Lue todisteet tämän ajan lopussa.

-Varmista, että kontrollit antoivat odotetusti. Vertaa testinäytteen reaktiota kontrolleihin. Ilmoita positiivisena, jos agglutinaatiota havaitaan, ja negatiivisena, jos agglutinaatiota ei ole.

Positiivinen testi osoittaa, että potilaalla on vähintään 25 IU / ml anti-Brucella-vasta-aineita.

Positiivisen (agglutinaation kanssa) ja negatiivisen (ilman agglutinaatiota) reaktion tulkinta. Lähde: Citrulline. Muokattu kuva.

Tekniikka (puolikvantitatiivinen)

Jos näyte on kvalitatiivisessa reaktiossa voimakkaasti positiivinen, se voidaan puolikvantifioida. Tätä varten näytteestä tehdään sarja kaksinkertaiset laimennukset fysiologisella suolaliuoksella. Edellä kuvattu menetelmä suoritetaan jokaisella laimennoksella.

Sitä tulkitaan myös tarkkailemalla agglutinaatiota makroskooppisesti. Tuloksena on korkeimman laimennoksen tiitteri, jossa havaittiin positiivinen tulos.

Anti-Brucella-vasta-aineiden likimääräisen arvon laskemiseksi käytetään seuraavaa kaavaa:

25 IU / ml x reaktiotiitteri = IU / ml

Esimerkki: jos potilaalla, joka on puolikvantitatiivisessa testissä, testi on positiivinen ½, ¼ ja 1/8 -laimennoksessa ja se alkaa olla negatiivinen 1/16-laimennoksesta lähtien, tämä tarkoittaa, että potilaan tiitteri on 8.

Kaavan soveltaminen:

25 IU / ml x 8 = 200 IU / ml

QA

- Sarjoissa on viimeinen käyttöpäivä ja sitä on noudatettava. Ei tulisi käyttää, jos reagenssi on vanhentunut.

-Käytä käytön aikana, että reagenssi ei sisällä kiinteitä hiukkasia, koska tämä on merkki pilaantumisesta.

- Pidä 2 - 8 ° C.

-Älä jäädydy, tämä teko vahingoittaa reagenssia korjaamattomasti.

- Suorita testi aina negatiivisten ja positiivisten kontrollien kanssa.

-Tekniikka sietää seeruminäytteitä, joilla on tietynasteinen lipemia ja hemolyysi, mutta ei ole suositeltavaa käyttää liian lipeemisiä ja hemolysoituja seerumeita, molemmat olosuhteet muuttavat testin tuloksia.

-Anna reagenssit aina huoneenlämpötilaan ennen analyysin aloittamista.

- Älä tulkitse reaktioita, jotka kestävät pidempään kuin suositeltu aika, koska tämä tuottaa väärien positiivisten raporttien, koska tietyn ajan kuluttua reagenssi saostuu, mikä simuloi positiivista reaktiota.

-Tekniikka on 100% herkkä ja sen spesifisyys on 98%.

- 1000 IU / ml: n puolikvantifioinnin jälkeen on mahdollista havaita protsonivaikutus (väärät negatiiviset, koska vasta-ainetta on liikaa antigeenien määrään verrattuna).

Viitteet

1. Rubio M, Barrio B ja Díaz R. Rosa de Bengala-, koombs- ja vastaimmunoelektroforeesitestien arvo ihmisten luomistaudin diagnosoimiseksi, jolloin seerumin agglutinaatio on negatiivinen. Mikrobiologian laitos. Kliinisen mikrobiologian palvelu. University Clinic. Navarran yliopisto. 406-407. Saatavana osoitteessa elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas
2. "Bruselloosi." Wikipedia, ilmainen tietosanakirja. 6. joulukuuta 2019, 14:37 UTC. 18. joulukuuta 2019, 18:09 fi.wikipedia.org.
3. Monlab Laboratories. Monlab Bengal Rose - testi. 2016.Saatavilla osoitteessa: monlab.es/
4. Carrillo C, Gotuzzo E. Brucellosis. Rev. Peru. Med. Exp. Kansanterveys 1997; 14 (1): 63 - 66. Saatavana osoitteessa: scielo.org
5. Morales-García R, García-Méndez N, Regalado-Jacobo D, López-Merino A, Contreras-Rodríguez A. Luomistaudin aiheuttavan perheen kliinisen, serologisen ja polymeraasiketjureaktion seuranta. Chil. Infectol. 2014; 31 (4): 425-433. Saatavana osoitteessa: scielo.conicyt.