SAFRANIINI: OMINAISUUDET, KÄYTTÖ, TEKNIIKAT, TOKSISUUS - KEMIA - 2026

Safraniinin on meriquinoide väriaine, nimetty sen kemiallinen rakenne, jossa on kaksi bentsenoidirenkaisiin ja 2 quinoid renkaat, jälkimmäinen ne, jotka tarjoavat väri punainen.

Sitä kutsutaan myös dimetyyli safraniinin tai emäksinen punainen 2 sen lyhyessä muodossa, koska sen tieteellinen nimi on 3,7-diamino-2,8-dimetyyli-5-fenyyli-phenaziniumchloro dimetyyli safraniinin ja kemiallinen kaava on C ₂₀ H ₁₉ N ₄ cl.

Safraniinin kemiallinen rakenne osoittaen bentseeni- ja kinoidirenkaat / safraniinin vesiliuos. Lähde: NEUROtiker toimittanut MSc. Marielsa Gil / LHcheM

On olemassa variantti nimeltään trimetyylisafraniini, mutta näiden kahden aineen välillä ei ole merkittävää eroa.

Safraniini on yksivärinen väri ja kemiallisen kaavan ominaisuuksista riippuen positiivisesti varautunut aine. Siksi sillä on affiniteetti negatiivisesti varautuneisiin rakenteisiin. Nämä rakenteet värjätään punaisella.

Tämä ominaisuus antaa sille soveltuvuuden monissa histologisissa tekniikoissa värjätä erilaisia ​​solurakenteita, sekä eukaryoottisia että prokaryoottisia organismeja.

Safraniinia käytetään kontrastivärinä tärkeissä ja tunnetuissa tekniikoissa rutiinikäyttöön bakteriologiassa. Nämä tekniikat ovat: Gram-Hucker-tahra, Schaeffer Fulton -värjäys itiöiden itämiseen tai bakteerikapselien värjäykseen.

ominaisuudet

Sahramin väri (mauste, joka on saatu Crocus sativus -kukan leimauksista) oli inspiraatio nimetä tämä väriaine. Termistä sahrami tulee nimi safraniini. Tämä johtuu sahramin värin ja tämän väriaineen tarjoaman värin suuresta samanlaisuudesta.

Safraniini on saatavana kiteinä tai jauheina, molemmat esitykset ovat liukoisia veteen. Safraniiniväriaine on hajuton. Tahroittaa rakenteet punaisiksi. Rakenteita, jotka houkuttelevat safraniiniväriainetta, kutsutaan safranofiileiksi.

Rakenteellisesti safraniini on monimutkainen, sen päissä on kaksi bentseenirengasrengasta ja kaksi kinoidirengasta, joissa N ⁺ -kationi sijaitsee keskellä. Rakenteen keskipiste on järjestelmä, joka vastaa värin toimittamisesta. Tämän ominaisuuden vuoksi tämä väriaine luokitellaan luokkaan II.

Käyttää

Safraniinia käytetään värjäämään erilaisia ​​rakenteita. Erityisesti korostetaan maha-suolikanavassa olevia Kulchitsky-soluja, joita kutsutaan myös enterokromafiinisoluiksi.

Se kykenee värjäämään Rickettsiaceae-sukuun kuuluvia mikro-organismeja. Samoin sitä käytetään erilaisissa tekniikoissa, kuten Koster-menetelmässä, modifioidussa muodossa, jota käytetään Brucella-suvun bakteerien värjäämiseen.

Toisaalta safraniinia käytetään Schaeffer Fulton itiövärjäystekniikassa ja Gram-Hucker -värjäyksessä. Molemmissa tekniikoissa safraniini toimii kontrastivärinä.

Ensimmäisessä itiöt saavat malakkiittivihreän värin ja loput rakenteet ovat safraniinin punaisia. Toisessa vaiheessa gramnegatiiviset bakteerit menettävät violetin kiteen värin värjäytymisvaiheessa, siksi safraniini värjää grammanegatiiviset bakteerit punaisiksi.

Lisäksi safraniinia käytetään bakteriologiassa valmistamaan Brucella-agarväliaineita laimennuksella safraniini 1: 5000. Tämän väliaineen avulla voidaan erottaa Brucella suis -lajit muista lajeista. Brucella melitensis ja Brucella abortus kasvaa tällä väliaineella, mutta B. suis estetään.

Maatalouden teollisuuden alalla safraniinia on käytetty 2,25% ja laimennettu suhteella 1:10 sokeriruokolaitoksen varren näytteiden värjäämiseen.

Tähän kasviin vaikuttavat yleisesti bakteerit Leifsonia xyli subsp. xyli, joka vahingoittaa kasvin ksyleemia. Värjätyt varret arvioidaan ksylemisuonien toiminnan määrittämiseksi.

Bakteriologian tekniikat

Castañeda-tahra r-värjäykseen

Veri- tai kudosliuos asetetaan puskuriliuokseen (fosfaattipuskuri, pH 7,6). Annetaan kuivua itsestään ja peitetään sitten metyleenisinisellä 3 minuutin ajan ja maalimaalataan safraniinilla. Rickettsiat ovat sinisiä, punaisen taustan vastaisia.

Kosterin tahra muutettu

Sytytin tehdään ja liekki sytyttimessä kiinnitystä varten. Seuraavaksi se peitetään seoksella, jossa on 2 osaa tyydyttynyttä vesipitoista safraniinia ja 3 osaa 1 mol / L KOH-liuosta, yhden minuutin ajan. Pestään tislatulla vedellä ja pestään 1% karboolimetyleenisinisellä.

Jos näyte sisältää Brucella-suvun bakteereja, ne näkyvät oranssina sinisellä pohjalla.

Bakteerikapselin värjäys

Seos bakteerisuspensiota tehdään Intian musteella ja lisätään safraniinia. Mikroskoopin alla jokaisen bakteerikapselin ympärillä on punertava halo, mustalla taustalla.

Itiövärjäys

Levitys tehdään bakteerisuspensiolla. Sitten se kiinnitetään lämmitykseen. Se on päällystetty 5-prosenttisella malakkiittivihreällä, palaen usein, kunnes höyryjä muodostuu. Prosessi toistetaan 6-10 minuutin ajan. Lopuksi se pestään vedellä ja kontraindisoidaan 0,5-prosenttisella safraniinilla 30 sekunnin ajan. Bacillit värjäytyvät punaisiksi ja itiöt vihreiksi.

Gram-Hucker-tahra

Mastari tehdään bakteerisuspensiolla ja kiinnitetään lämmölle. Peitä objektilasi kristallivioletilla yhden minuutin ajan. Sitten lugol asetetaan peiteliuokseksi 1 minuutiksi. Seuraavaksi se valkaistaan ​​asetonialkoholilla ja lopulliseksi esivaroidaan safraniinilla 30 sekunnin ajan.

Gram-positiiviset bakteerit värjäävät sinertävän violetilla ja gram-negatiiviset bakteerit punaisilla.

Jotkut laboratoriot ovat lopettaneet Gram-Hucker-tekniikan käytön muokatun Gram-Kopeloff-tekniikan omaksumiseksi. Viimeksi mainitussa safraniini korvataan emäksisellä fuksinilla. Tämä johtuu siitä, että safraniini värjää heikosti Legionella-, Campylobacter- ja Brucella-sukujen lajeja.

Histologian tekniikat

Kulchitsky-solujen värjäys (enterokromafiinit)

Kudosleikkeet maha-suolikanavasta värjätään hopeakloridilla. Sitten se väri väristetään natriumtiosulfaatilla ja lopuksi varmistetaan uudelleen safraniinilla.

Kulchitsky-solut eroavat mustanruskeista rakeista.

Nivelrikon tahra

Koska safraniinilla on positiivinen varaus, se sitoutuu erittäin hyvin glykosaminoglykaanien karboksyyli- ja sulfaattiryhmiin. Nämä ovat osa proteoglykaaneista, jotka muodostavat nivelruston. Tässä mielessä värjättäessä safraniini O: lla voidaan tunnistaa onko rustohäviö vai ei.

Rustokudoksen menetys voidaan mitata käyttämällä Mankin-asteikkoa tai sitä kutsutaan myös nivelrikko-asteikkoksi.

Tekniikka selitetään alla: histologinen osa upotetaan astiaan Weigertin rautahematoksyliiniliuoksella, johdetaan sitten hapan alkoholin läpi ja pestään vedellä.

Jatka väritysprosessia upottamalla objektilasi nopeasti vihreään, se pestään etikkahapolla ja upotetaan nyt safraniini O. Prosessin loppuun saattamiseksi se dehydratoidaan käyttämällä alkoholia eri konsentraatioissa nousevassa järjestyksessä. Viimeinen vaihe vaatii ksyleenin tai ksyleenin näytteen selkeyttämiseksi.

Leikkeet käsitellään Kanada-balsamilla tai vastaavalla, jota voidaan tarkkailla mikroskoopin alla.

Tällä tekniikalla ytimet värjätään mustiksi, luu vihreäksi ja rusto, jossa proteoglykaanit ovat punaisia.

Stain makrolevien tunnistamiseen

Pérez ym. Ehdottivat vuonna 2003 yksinkertaista ja edullista tekniikkaa makrolevien värjäämiseksi. Näytteet valmistetaan parafiinin histologisissa osissa. Leikkeet kiinnitetään 1-prosenttisella glyserolilla, antaen niiden kuivua kokonaan. Sitten se pannaan ksyloliin parafiinin poistamiseksi.

Leikkaus hydratoidaan uudelleen johtamalla sitä astiasarjan läpi, joka sisältää etanolia eri konsentraatioasteissa (alenevassa järjestyksessä), 2 minuutin ajan jokaisessa.

Seuraavaksi sitä värjätään 5 minuutin ajan seoksella, joka sisältää 1% safraniinia ja 1% toluidiinisinistä, 3: 1, joka on valmistettu 50% etanolilla. Seokseen lisätään kolme tippaa pikriinihappoa, joka toimii saostusaineena.

Sitten se kuivataan kuljettamalla alkoholialustojen läpi taas, mutta tällä kertaa nousevalla tavalla. Lopuksi se huuhdellaan ksylolilla ja näyte valmistetaan Kanadan balsamilla tarkkailtaviksi.

Myrkyllisyys

Onneksi safraniini on väriaine, joka ei ole vaara niille, jotka sitä käsittelevät. Se on vaaraton väriaine, se ei ole syöpää aiheuttava eikä se ole palava.

Suora kosketus ihon tai limakalvon kanssa voi aiheuttaa lievän punoituksen alueella, ilman suuria komplikaatioita. Tätä varten on suositeltavaa pestä vaurioitunut alue runsaalla vedellä.

Viitteet

1. García H. Colorante safranina O. Terveysasiantuntija, 2012; 1 (2): 83 - 85. Saatavana osoitteessa: medigraphic.com
2. Gil M. Gram -värjäys: perusta, materiaalit, tekniikka ja käyttötarkoitukset. 2019. Saatavissa osoitteessa: lifeder.com
3. Gil M. Spore -värjäys: perusteet, tekniikat ja käytöt. 2019. Saatavissa osoitteessa: lifeder.com
4. Safranina. " Wikipedia, ilmainen tietosanakirja. 7. maaliskuuta 2017, kello 10:39 UTC. 3. elokuuta 2019, 20:49 fi.wikipedia.org
5. Pérez-Cortéz S, Vera B, Sánchez C. Hyödyllinen värjäystekniikka Gracilariopsis-tenuifronien ja Gracilaria chilensiksen (Rhodophyta) anatomisessa tulkinnassa. Laki Bot. Venez. 2003; 26 (2): 237 - 244. Saatavana osoitteessa: scielo.org.
6. Aleika-kirkko, Peralta Esther Lilia, Alvarez Elba, Milián J, Matos Madyu. Ksylemisuonien toiminnallisuuden ja Leifsonia xyli subsp. xyli. Rev. Vega -suoja. 2007; 22 (1): 65 - 65. Saatavana osoitteessa: scielo.sld