- Perustus ja materiaalit
- tarvikkeet
- Askeleet
- Makroskooppinen ja mikroskooppinen tutkimus
- Alkuperäinen Faust-tekniikka
- Faust-tekniikka sentrifugoimalla
- Etu
- haitat
- Viitteet
Faust tekniikka on menetelmä, joka mahdollistaa pitoisuus munia ja / tai toukkien loisten sisältämän ulosteet kelluvilla. Sitä käytetään, kun suorat koproparasitologiset testit ovat negatiivisia tai kun haluat saada puhtaita näytteitä, joissa ei ole detritusta.
Koproparasitologisten tutkimusten keskittymismenetelmät ovat kolmen tyyppisiä: vaahdotuksella, sedimentaatiolla tai menetelmillä, joissa yhdistetään kaksi edellistä. Nämä menetelmät lisäävät positiivisten tulosten mahdollisuutta.

Ulosteen analyysi.
Faust-menetelmä koostuu sekoittamalla osa ulosteesta näytteeseen aineella, joka on tiheämpi kuin tiivistettävät munat tai loiset. Tämä aiheuttaa sen, että koska ne ovat vähemmän tiheitä, ne kelluvat pinnalla. Supernatanttineste kerätään ja tarkastetaan mikroskoopilla tunnistamista ja kvantifiointia varten.
Tätä menetelmää käytetään visualisoimaan helmintimunat. Samanaikaisesti se on osoittautunut erittäin herkäksi menetelmäksi Giardia lamblia-diagnoosissa, joka on levinnyt alkueläin, joka on levinnyt ympäri maailmaa. Vaahdotusmenetelmiä ei suositella erittäin raskaille loisten munille, kuten nauhamatoille ja trematodeille.
Loiset ovat yksi maailman yleisimmistä suolistoinfektioista, etenkin köyhissä maissa, joissa hygieniatoimenpiteet ovat huonot. Tästä syystä on herkkä menetelmä näiden loisten tunnistamiseksi ja kvantifioimiseksi erittäin hyödyllinen diagnoosissa ja hoidossa.
Perustus ja materiaalit
Tekniikka perustuu munien, loisten, kystat, toukkien ja detrituksen erityisten ominaispainojen olemassaoloon, sinkkisulfaattiliuoksia käytettäessä vaahdotusmenetelmänä.
Tekniikan perusteena on sekoittaa näyte sinkkisulfaattiliuokseen, jonka tiheys on suurempi kuin vaaleampia munia, toukkia tai loisia.
Tämän ansiosta raskaammat elementit saostuvat ja kevyemmät kelluvat, jotka ilmestyvät supernatanttiin näytteiden sentrifugoinnin jälkeen.
tarvikkeet

Kontit fekaalinäytteiden keräämiseen (Lähde: Bobjgalindo Wikimedia Commonsin kautta)
- Valmistetaan sinkkisulfaattiliuos, jonka tiheys on 1,18 tai 1,2 g / ml, jos näytettä on aikaisemmin käsitelty.
- Valmistele teline aiemmin leimattuilla koeputkilla.
- Pidä keskipakokonetta.
- Pidä mikroskoopin dioja ja suojuksia käsillä. Kaikki on merkittävä
- Varmista, että Lugolin ratkaisu on saatavana arkkien värjäämiseen.
- Pidä harso suodatettavaa.
- Pidä suppiloita ja tislattua vettä.
- Etsi merkityt muovi- tai pahvilaatikot.
- Myös applikaattorit ja 5 mm steriili kahva.
- Sytytin kahvan steriloimiseksi.
Askeleet
Makroskooppinen ja mikroskooppinen tutkimus
Kaikkien ulosteiden tarkastusta varten tutkimus alkaa näytteiden "bruttotarkastuksella".
Kuvaillaan veren konsistenssi, väri, sen vaikutelma, lima ja aikuisten loisten läsnäolo.
Sitten siirrymme ulosteen "mikroskooppiseen tutkimukseen", tämä riippuu menetelmästä. Yksinkertaisin on suora pintamenetelmä, joka on yksinkertaisin loisten mikroskooppinen havaintomenetelmä.

Valokuva suolen loisen Gardia lamblia havainnoista (Lähde: Riddlemaster Wikimedia Commonsin kautta)
Menetelmässä asetetaan pieni määrä näytettä suoraan objektilasille. Aseta useita tippoja suolaliuosliuosta, jonka koon tulisi olla samanlainen kuin näyte. Sekoita suolaliuosliuos jakkaleen kanssa, kunnes muodostuu homogeeninen seos. Aseta kansi ja tarkasta mikroskoopin alla.
Alkuperäinen Faust-tekniikka
Toinen menetelmä koostuu Faust-float-menetelmästä, jonka alkuperäinen versio koostuu:
1- Aseta noin kaksi grammaa ulostetta tähän tarkoitukseen sopivaan astiaan.
2 - Lisää 30 ml sinkkisulfaatin vaahdotusliuosta, jonka kanssa emulsio valmistetaan sekoittamalla liuos ulosteen kanssa.
3 - Siivilöi metallisuodattimella toiseen astiaan ja siirrä koeputkeen.
4 - Lisää vaahdotusliuosta, kunnes putkeen muodostuu meniski.
5- Aseta lasinen kansilevy meniskille. Anna sen levätä 10-15 minuuttia.
6- Poista kansilasi ja aseta se objektilasille, jota tutkitaan mikroskoopilla.
Faust-tekniikka sentrifugoimalla
Alun perin menetelmä ei käyttänyt sentrifugointia, mutta se sisältyy nyt, koska saadaan parempia tuloksia. Tekniikka sisältää sarjan vaiheita oikean toimenpiteen saavuttamiseksi, nämä ovat seuraavat:
1- Ulosteet pestään vedellä, sekoitetaan hyvin ja suodatetaan sitten neljään taitettuun marliin. Näyte asetetaan koeputkeen.
2- Sentrifugoi ja poista supernatantti (näytteet, joita pidetään veden yläpuolella). Vaiheet 1 ja 2 toistetaan, kunnes supernatantti on "kirkas".
3- Sinkkisulfaatti lisätään suodatettuun ja sentrifugoituun näytteeseen.
4 - Se sekoittuu hyvin.
5- Sentrifugoidaan uudelleen 1 minuutin ajan nopeudella 2500 rpm (kierrosta minuutissa).
6- Supernatantti otetaan talteen steriilillä silmukalla, joka on noin 5 mm; putkia ei tule ravistaa.
7- Supernatantista otettu näyte asetetaan objektilasille ja pisara Lugolia voidaan asettaa värittämään, kansilasi asetetaan ja tarkkaillaan mikroskoopin alla.
8- Astiat ja koeputket on merkitty.
Etu
- Diagnoosissa käytetyt elementit voidaan nähdä puhtaina ja ilman ”detritusta”, mikä helpottaa arkin havaitsemista ja vähentää diagnoosiin kuluvaa aikaa.
- Supernatantissa otetaan toukat, munat ja / tai kystat talteen.
- Se on erittäin edullinen menetelmä.
- Menettely on hyvin yksinkertainen ja helppo toteuttaa.
- Diagnoosi on nopea ja tarkka.
- Koska parasitoosien merkitys ja suuri esiintyvyys köyhissä maissa, nämä edulliset ja helppokäyttöiset menetelmät ovat ihanteellisia näiden patologioiden diagnosointiin ja seurantaan.
haitat
Vaahdotusliuoksen tiheys saa aikaan toukkien supistumisen, toisin sanoen ne kutistuvat ja voivat hyvin lyhyessä ajassa deformoitua. Tämä pakottaa tutkijan tekemään diagnoosi heti, ja käsiteltyjä näytteitä ei voida pitää tulevia tutkimuksia varten.
Kuten kaikissa mikroskooppisissa tunnistusmenetelmissä, myös kokeneita tutkijoita tarvitaan tarkkojen diagnoosien tekemiseen.
Diagnoosissa tarvittavien elementtien nopea muodonmuutos, vaikka ne ovatkin ilmeinen haitta, voidaan korjata tekemällä välittömiä mikroskooppisia havaintoja.
Viitteet
- Ananias, FL (2017). Faust-menetelmän ja spontaanin sedimentaation herkkyyden arviointi giardiaasin diagnoosissa. Cuban Journal of Tropical Medicine, 68 (2).
- Bartlett, MS, Harper, K., Smith, N., Verbanac, P., & Smith, JW (1978). Muunnellun sinkkisulfaatin vaahdotustekniikan vertaileva arviointi. Journal of kliininen mikrobiologia, 7 (6), 524-528.
- Becker, AC, Kraemer, A., Epe, C., & Strube, C. (2016). Valittujen koproskooppisten menetelmien - sedimentoinnin, yhdistetyn sinkkisulfaatin sedimentaatio-vaahdotuksen ja McMaster-menetelmän herkkyys ja tehokkuus. Parasitologiatutkimus, 115 (7), 2581 - 2587.
- Garcia, LS, Arrowood, M., Kokoskin, E., Paltridge, GP, Pillai, DR, Procop, GW,… & Visvesvara, G. (2018). Ruoansulatuskanavan loisten laboratoriotutkimus. Kliiniset mikrobiologiset katsaukset, 31 (1), e00025-17.
- Summers, WA (1942). Sinkkisulfaatin sentrifugaalisen vaahdotusmenetelmän muuntaminen helmintin munasolujen talteenottamiseksi formalisoiduissa ulosteissa. Journal of Parasitology, 28 (4), 345 - 346.
