- Verikohdan ominaisuudet
- Verityyppityypit
- Verinäytteiden ottamismenetelmät
- Veren määritysmenetelmät
- - Liukumäerät
- Levyihin tehdyt leviämisen osat
- Dian tekniikan laadunvalvonta
- -Laita kannessa
- Kansilaitteiden laadunvalvonta
- -Automaattisilla laitteilla
- Paksu sivelytekniikka
- Hajuvärjäys
- Giemsa-tahra
- Wrightin tahra
- Tyypit viallisia tahroja
- Eri paksuusalueilla olevat ohuet (ohuet ja paksut välissä olevat)
- Erittäin lyhyt sivelymitta
- Haavaa haalealla alueella kohti päällysteen loppua
- Vaikuta vakuolimuodostelmalla tai selkeillä pyöristetyillä tai ellipsisillä alueilla
- Erittäin paksut tai erittäin ohuet tahrat
- histologia
- -Erytrosyytit tai punasolut
- -Valkoiset verisolut tai valkosolut
- Segmenttiset neutrofiilit
- Segmentoidut eosinofiilit
- Segmentoidut basofiilit
- lymfosyytit
- monosyytit
- -Platelets
- Patologiset elementit
- Veren loiset
- Bakteerit
- Epäkypsät solut
- Viitteet
Verisivelyvalmisteeseen on perifeerisen veren preparaatti, jota käytetään analysoimaan komponentit läsnä verenkierrossa. Verimusta havaitseminen antaa hematologista tietoa, joka on erittäin hyödyllinen monien patologioiden diagnoosissa ja seurannassa.
Verimaidon avulla voidaan määrittää erittyyppisten valkosolujen lukumäärä (leukosyyttikaava), samoin kuin erytrosyyttien, leukosyyttien ja verihiutaleiden morfologian ja muodon analysointi.
Verikohdan valmistelu. Lähde: Veri laboratoriolasissa. Public DomainPictures.net
Siinä voidaan havaita epänormaalit solumäärät, kuten: leukosytoosi tai leukopeniat, lymfosytoosi tai lymfopenia, neutrofiilia tai neutropenia, trombosytoosi tai trombosytopeniat ja eosinofilia. Solujen koon ja muodon poikkeavuudet voivat myös näkyä.
Lisäksi on mahdollista havaita erityyppisiä anemioita, leukemioita ja bakteeri- tai veri-loistartuntoja.
Tätä varten on olemassa erityyppisiä tahroja, jotka suoritetaan tutkimuksen tarkoituksesta riippuen. Siellä on ohuita ja paksuja tahroja. Nämä tahrat eroavat toteutustekniikasta ja tutkimuksen tarkoituksesta.
Niitä, joilla on hienoja tippoja, käytetään lisäaineena täydelliseen hematologiaan. Tämä tarjoaa tietoja leukosyyttikaavasta, veriä muodostavien kolmen solusarjan muodon ja morfologian analyysien lisäksi: punaiset sarjat, valkoiset sarjat ja verihiutaleet. Vaikka ne toimivat myös täydennyksenä paksun verikalvon tutkimukselle.
Paksua kalvoa käytetään hemoparasiittien aiheuttamien sairauksien, kuten malarian tai malarian, toksoplasmoosin, leishmaniaasin, Chagasin taudin, babesioosin ja mikrofilariaasin, diagnosointiin.
Verikohdan ominaisuudet
Hyvän verikokeen on täytettävä tietyt ominaisuudet. Niistä voidaan mainita:
- Näytteen on täytettävä edustavia edustavia vähimmäislaatuvaatimuksia.
- Näytteenotto on suoritettava hyvin.
-Tapauksen oikea-aikainen suorittaminen.
-Jos suoritetaan laskimoverillä, käytä antikoagulanttia, joka ei deformoi soluja, ja sekoita putki ennen pistämistä.
-Jos se tehdään kapillaariverillä, heitä ensimmäinen tippa pois.
- Levityksen on oltava tasalaatuista. Tämä varmistaa, että solut jakautuvat tasaisesti ja että verisoluista voidaan tehdä hyvä analyysi muodon ja lukumäärän suhteen.
-Värjäyksen sivujen tulee olla sileät alusta loppuun.
-Vaikannuksen on oltava 1 - 2 mm: n marginaali lasin sivuihin nähden.
-Vaikutuskerroksen paksuuden tulee vähitellen vähentyä alusta loppuun (sivele pienellä pudotuksella liukumenetelmällä).
- Se on merkittävä asianmukaisesti, jotta vältetään näytteiden sekaannukset.
- Kiinnitä ja värjää asianmukaisesti verielementtien selkeään havaitsemiseen.
-Anna sively kuivumaan erittäin hyvin ennen valmisteen asettamista mikroskoopin alle. Upotusöljyn sijoittaminen märälle levitykselle aiheuttaa misellien muodostumisen, jotka estävät soluja näkemästä.
Verityyppityypit
Perifeeriset veren levitteet voidaan luokitella ohuiksi ja paksuiksi. Niitä, joilla on ohut kerros, käytetään leukosyyttikaavan tutkimiseen ja verisolujen morfologiseen tarkkailuun. Solunulkoiset bakteerit, kuten borrelia, ja solunsisäiset hemoparasiitit, kuten esimerkiksi plasmodium, voidaan myös nähdä.
Hienossa möykkyssä loisten lajit voidaan tunnistaa, joten se on spesifisempi tekniikka kuin paksu möhkäle, mutta paksua möykky on herkempi, koska se on väkevöintitekniikka, jota käytetään tyhjentävästi etsimään solunulkoisia hemoparasiitteja.
On olemassa kahden tyyppisiä hienovaraisia leviämiä: ne, jotka suoritetaan dioille ja peitelasille. Paksut tahrat suoritetaan dioille.
Verinäytteiden ottamismenetelmät
Verimäräyttöt voidaan tehdä kapillaaripisteestä tai laskimonäytteestä, joka on otettu antikoagulantilla. Jos se tehdään verestä antikoagulantin kanssa, levitys voidaan valmistaa 2 tunnin kuluessa näytteen ottamisesta.
Varovaisuutta on käytettävä antikoagulantteihin, jotka eivät vääristä verisoluja. Paras vaihtoehto on EDTA. Päinvastoin, antikoagulanttien, kuten trinatriumsitraatin, käyttöä tulisi välttää.
Jos näyte otetaan kapillaaripistolla, leviämistä on jatkettava välittömästi ennen verihyytymistä.
Ensimmäinen tippa on heitettävä pois, jolloin seuraava tippa voi poistua itsestään, jotta vältetään näytteen laimeneminen kudosnesteellä. Se on suositeltuin tekniikka solumorfologian havaitsemiseksi, koska veressä ei ole lisäaineita.
Hemoparasiittien havaitsemiseksi Solari ym. Päättivät tutkimustyössään, että molemmat tekniikat (laskimo ja kapillaari) ovat yhtä tehokkaita.
Verenäytteen tyypit: A. Kapillaarin puhkaisu. B. Laskimo punktio. Lähde: A. Flickr.com B. Pxhere.com
Veren määritysmenetelmät
Verimäräys voidaan suorittaa manuaalisesti mikroskoopin dioilla tai kannessa tai dioissa. Se on mahdollista myös automatisoitujen laitteiden avulla.
- Liukumäerät
Se on tekniikka, jota useimmat laboratoriot pitävät parempana sen helpon käsittelyn takia.
Aseta Pasteur-pipetillä ei kovin paksu tai erittäin hieno veripisara puhtaan mikroskoopin diojen toisen pään keskelle.
Levitys tehdään toisen, maapäällä olevan liuskan avulla. Hiomalasilasi asetetaan kohtisuorassa sen pään vastakkaiselle puolelle, jossa tippa sijaitsee.
Se kallistuu 30 - 45 °: n kulmaan ja liukuu kohti pudotusta; Koskettaessaan se laajenee lineaarisesti maapallon reunan yli ja vakiona ja määritellyllä liikkeellä arkki palaa takaisin; ennen liukukannen saavuttamista liuku nostetaan.
Tällä tavalla homogeeninen kerros levitetään vastaanottolasin pintaan.
Levityksen annetaan kuivua. Sitten se kiinnitetään ja värjätään edullisella tahralla. Anna kuivua hyvin ennen tarkastelua mikroskoopin alla. Pisara öljyä asetetaan kasvoille osoittaen tahroja ja tarkkaillaan valomikroskoopilla.
Veren leviäminen objektilasilla. Yläkuva: värjäämätön tahri. Alempi kuva: tahrattu tahri. Lähde: Coinmac
Levyihin tehdyt leviämisen osat
Tämän tyyppisessä pinnassa voidaan erottaa kolme määriteltyä aluetta: pää, vartalo ja häntä. Pää vastaa aluetta, josta tahri alkaa, se on paksin alue, eikä sitä ole hyvä havaita.
Keho on keskimäärin tai välikappale, se on paras alue, jota voidaan tarkkailla mikroskoopin alla, koska siellä solut jakautuvat tasaisesti ja niiden morfologia säilyy.
Häntä vastaa loppuosaa; tässä jakauma ei ole enää tasainen ja erytrosyyttien morfologia yleensä menettää.
Dian tekniikan laadunvalvonta
Tässä tekniikassa sillä on perustavanlaatuinen rooli:
- Levyn puhdistus ja rasvanpoisto: se takaa näytteen hyvän liukumisen.
-Pisaran koko: erittäin suurilla tippoilla saadaan paksumpi ja pidempi sively, hyvin pienellä pisaralla levitys on lyhyempi ja erittäin hieno.
- Laajennuksessa käytetty nopeus: mitä pienempi nopeus on ohuempi, sitä suurempi nopeus sitä paksumpi.
-Toteutuskulma: mitä pienempi kulma, sitä hienompaa on sively, sitä suurempi kulma on paksumpi.
-Laita kannessa
Sitä ei käytetä laajasti, koska hauraiden peitelevyjen käsittely on vaivalloista, mutta se tarjoaa suuria etuja, koska solujen parempi jakautuminen saavutetaan koko levässä.
Ei kovin paksu, ei kovin hieno pudotus asetetaan kansiosan keskelle. Tämän päälle asetetaan heti toinen peitelevy siten, että kummankin peitelevyn kärjet ulkonevat muodostaen tähden.
Pudotus leviää spontaanisti molempien peitelasien pintaan. Jatkeen lopussa jokainen liuku liu'utetaan toistensa vastakkaiselle puolelle (yksi oikealle ja toinen vasemmalle) nopeasti.
Tekniikka tarjoaa kaksi särmää yhden sijasta.
Ne asetetaan kuivumaan levityspuoli ylöspäin. Kun se on kuivunut, se kiinnitetään ja värjätään valitsemalla tekniikalla. Anna kuivua. Pisara upotusöljyä asetetaan objektilasille, levityslaite asetetaan rasvapuoli alaspäin ja katsotaan mikroskoopin alla.
Kansilaitteiden laadunvalvonta
Saadaksesi hyvä tekniikka tälle tekniikalle on tärkeää:
-Kannenluiden puhdistus (auttaa näytteen liukumista sujuvasti).
-Pisaran koko (vaikuttaa pinnan paksuuteen).
-Nopeus, jolla peitelasit erotetaan (vaikuttaa levityksen homogeenisuuteen).
-Automaattisilla laitteilla
Ne voidaan suorittaa millä tahansa näistä joukkueista: Spinner ja Autoslide.
Spinner koostuu aseman sijoittamisesta tipalla verta erityiselle sentrifugilevylle. Näyte sentrifugoidaan suurilla nopeuksilla; tällä tavalla näytteestä muodostuu homogeeninen ja hieno kerros. Sillä on haittana näytteen mahdollisuus hemolyysiin.
Autoslide on instrumentti, joka suorittaa mekaanisesti liikkeet levityksen suorittamiseksi dioilla. Voit myös kiinnittää ja tahrata tahran. Sitä voidaan mukauttaa jopa joihinkin automaattisiin hematologialaskuriin.
Paksu sivelytekniikka
Hemoparasiittien etsimiseksi suositellaan kahta leviämistä: toisessa hieno tippa ja toisella paksu tippa.
Suorita kapillaarin puhkaisu, puhdista ensimmäinen tippa. Aseta hieno tippa levylle ja pese kuten aiemmin selitettiin. Aseta paksu helmi toiselle objektilasille ja levitä 1,55 mm: n neliöön. Anna kahden leivän kuivua.
Hajuvärjäys
Hienoja tippoja varten voidaan käyttää mm. Giemsa- tai Wright-tahroja. Giemsa- tai May-Grunwald Giemsa -värjäystä suositellaan paksuille tahroille.
Giemsa-tahra
Levitys kiinnitetään 3 minuutiksi metanolilla, valutetaan ja annetaan kuivua uudelleen. Tämän jälkeen levä peitetään Giemsa-tahralla 10 - 15 minuutin ajan. Se pestään tislatulla vedellä ja annetaan kuivua. Tarkkailemiseksi mikroskoopin alla pannaan tippa upotusöljyä.
Wrightin tahra
Levitys peitetään Wrightin tahralla 5 minuutin ajan. Hävitetään ja asetetaan puskuriliuos pH: hon 6,8 6 minuutiksi. Puhalta valmiste homogenoimiseksi. Pese tislatulla vedellä ja anna kuivua. Tarkkaile mikroskoopin alla.
Tyypit viallisia tahroja
Sitä esiintyy harjoittelijoilla hienon pudotuksen tekniikassa dioilla.
Eri paksuusalueilla olevat ohuet (ohuet ja paksut välissä olevat)
Se johtuu siitä, että suoritettu liike ei ollut vakio levityksen aikana, jolloin pysähtyi ja käynnistyi uudelleen.
Erittäin lyhyt sivelymitta
Niillä on 2 syytä: yksi johtuu tosiasiasta, että maadoitusluukku on nostettu ennen luistin toiseen päähän saavuttamista. Tässä tapauksessa se on erittäin paksu ja lyhyt.
Toisaalta, jos levä on lyhyt, mutta ohut, se johtuu siitä, että tippa oli hyvin pieni.
Haavaa haalealla alueella kohti päällysteen loppua
Sillä on useita syitä: yksi on se, että pohjareuna on viallinen, että vastaanottavaan liukuun kohdistuva paine kasvaa levityshetkellä tai että luistin maareuna on kulunut.
Vaikuta vakuolimuodostelmalla tai selkeillä pyöristetyillä tai ellipsisillä alueilla
Ne johtuvat rasvaisista tahroista (huonosti pestyistä ja rasvanpoistajista).
Erittäin paksut tai erittäin ohuet tahrat
Liian suuret tipat tuottavat erittäin paksuja tahroja alusta loppuun ja hyvin pienet tipat tuottavat erittäin hienoja määriä.
histologia
Verisolut voidaan nähdä verimestarissa. Niitä ovat:
-Erytrosyytit tai punasolut
Ihmisen veri, punasolut tai punasolut ja kaksi valkosolua. Otettu ja toimitettu: Viascos. Huomautuksesi on erittäin tärkeä. Tällä tasolla voidaan havaita anemiat, talasemia, luuytimen sairaus jne.
Punasolujen määrä tai punasolujen on noin 5 x 10 6 mm3 miehillä ja 4,5 x 10 6 naisilla. Punasolut ovat muodoltaan kaksoismurtaisia levyjä, joilla on keskeinen fysiologinen kalpeus. Ne voidaan nähdä erikseen (normaalina) tai muodostaa rullaaux-pinoja (epänormaali).
Vaaleissa esiintyy myös poikilosytoosia (erimuotoisia punaisia verisoluja), anisosytoosia (erikokoisia punasoluja), anisopoikilosytoosia (erimuotoisia ja -kokoisia), anisokromiaa (eri värejä), erytroplasteja (epäkypsät punasolut), mikrosytoosia (pienempiä punasoluja)) ja makrosyytit (suuret punasolut).
Kun heillä esiintyy hemoglobiinimäärän puutetta ja keskushermosto kasvaa, sanotaan olevan hypokromia. Kun havaitaan normaali punainen sarja, se ilmoitetaan normosyyttisenä ja normokromisena.
-Valkoiset verisolut tai valkosolut
valkosolut
Normaali määrä vaihtelee välillä 5 000 - 10 000 mm 3. Ne muuttuvat tarttuvissa prosesseissa, allergioissa ja leukemiassa. Verimustassa voidaan erottaa useita tyyppejä, jotka selitetään alla.
Segmenttiset neutrofiilit
Ne edustavat 55-65% kaikista leukosyyteistä. Niiden mitat ovat 10-15 μm. Heillä on segmentoitu tai lohkoinen ydin, jolla on erilaisia morfologioita, joten sitä kutsutaan polymorphonuclear.
Niiden sytoplasmassa on runsaasti neutrofiilisiä rakeita ja joitain atsurofiilejä. Ne lisääntyvät bakteeri-infektioissa (neutrofiilia), vähenevät virusinfektioissa (neutropenia).
Morfologisia poikkeavuuksia, kuten pleokaryosytoosia (hypersegmenttiset ytimet), kaaria (epäkypsiä soluja) tai makropoliiseja (soikeat ja suuret), voidaan havaita.
Muut muutokset:
-Myrkylliset rakeet
-Pseudo Pelger -neutrofiilit (ytimessä ei ole lobulaatioita tai ne ovat vaurioituneet).
-Döhle-rungot: tummansiniset sytoplasmiset sulkeumat.
- Lisääntynyt sytoplasminen basofilia.
-Ylettömyystoplasmiset tyhjiöt.
-Sellularisnikoosi (ydinsiltojen menetys).
Segmentoidut eosinofiilit
Ne edustavat 1 - 3% kaikista valkosoluista. Niiden mitat ovat 9-10 μm. Niille on ominaista runsaasti happofiilisiä sytoplasmisia rakeita ja muutama atsurofiili. Sen ytimessä on kaksi lobulaatiota. Niiden määrä kasvaa allergioissa ja loisperäisissä sairauksissa.
Segmentoidut basofiilit
Ne ovat erittäin harvinaisia, edustaen 0–1% leukosyyteistä. Niiden mitat ovat 10-12μm. Ydin on yleensä epäsäännöllinen reunoilla ja voi olla vaurioitunut, mutta sitä ei havaita sytoplasmassa olevien suurten basofiilisten karkeiden rakeiden vuoksi. Hyvin harvoin basofilia näkyy.
lymfosyytit
Ne ovat pieniä soluja, joissa on basofiilinen sytoplasma, ytimellä, hyvin määritelty, pyöreä, kondensoituneella kromatiinilla. Ydin kattaa melkein koko solun. Ne edustavat 26 - 40% veren leukosyyteistä. Ne lisääntyvät virusinfektioissa (lymfosytoosi). Reaktiiviset lymfosyytit voidaan nähdä.
monosyytit
Solut, jotka ovat suurempia kuin lymfosyytit, suurempi sytoplasma ja löysämpi, soikea kromatiiniytimi. Niiden mitat ovat 9-12μm. Sytoplasma on runsas ja näyttää yleensä vaalean harmaasiniseltä tavanomaisilla värjäystekniikoilla. Vacuoloidut monosyytit ja monosytoosi voidaan havaita muutosten joukossa.
-Platelets
Niiden mitat ovat välillä 1,5-3 μm. Sen muoto on pyöreä tai soikea. Normaaliarvo on välillä 150 000 - 350 000 verihiutaleita / mm3. Ne voivat vähentyä joissakin virusinfektioissa. Heillä ei ole ydintä ja ne ovat väriltään purppuraisia. Tässä sarjassa voi esiintyä poikkeavuuksia, kuten makro- tai mikrotason verihiutaleet, trombosytoosi tai trombosytopenia ja verihiutalefragmentit.
Patologiset elementit
Veren loiset
Hemoparasiitteja, kuten malarian tai malarian aiheuttajia (Plasmodium-suvun loiset), voi nähdä verimärissä. Tästä syystä on tärkeää, että levä analysoidaan manuaalisesti, koska automatisoidut laitteet ohittavat tämän havainnon.
Bakteerit
Patologioissa, kuten uusiutuva kuume tai Lymen tauti, sen aiheuttaja voidaan havaita. Tässä tapauksessa se vastaa Borrelia recurrenti spirochetes -bakteeria ja Borrelia burgdorferi -vertauhetta.
Epäkypsät solut
Vakavia tapauksia havaitaan mm. Leukemioissa, leukemoidisissa reaktioissa ja leukoerythroblastic -reaktioissa. Bakteeri-infektioissa saattaa olla pieniä poikkeamia vasemmalle (huijausten esiintyminen). Erytroplastit voivat näkyä myös joissain anemioissa.
Viitteet
- Veri ja hematopoieettiset kudokset. Saatavana osoitteessa: sld.cu
- Gomez A, Casas M. 2014. Angel. Kliininen laboratoriotulkinta. 8. painos. Toimittaja Médica Panamericana.
- Solari Soto L, Soto Tarazona A, Mendoza Requena D, Llanos -tilit A. Paksun laskimoveripisaran loisistiheyksien ja akupressurin vertailu Malaria vivax-diagnoosissa. Med Med Hered 2002; 13 (4): 140 - 143. Saatavana osoitteessa: scielo.org.
- Terry Leonard Nelson, Mendoza Hernández Carlos. Iäkkäiden ääreisveren määrän tutkimuksen merkitys. Medisur 2017; 15 (3): 362 - 382. Saatavana osoitteessa: scielo.sld
- Grinspan S. Perifeerisen veren määritys. Jatkuva lääketieteellinen koulutus. Saatavana osoitteessa: bvs.hn/RMH