UPOTUSÖLJY: KOOSTUMUS, OMINAISUUDET, KÄYTTÖ - BIOLOGIA - 2026

Immersioöljy on viskoosi kirkas neste, jonka taitekerroin on korkea. Tästä syystä sitä käytetään laajasti mikroskooppisissa havainnoissa, koska se tarjoaa ominaisuuden keskittyä valoon, kun se kulkee mikroskoopin 100X-objektiivin läpi, lisäämällä sen erotuskykyä.

Tämä tapahtuu, koska objektiivin ja rasvan väliin muodostuu viskoosi kalvo, joka estää valonsäteiden sirontaa, kun ne saavuttavat ilman, keskittäen siten valonsäteet kohti näytettä.

Dropper öljymerkinnällä ja mikroskoopilla tarkennettu 100X-objektiiviin käyttämällä öljy Upotusta. Lähde: Pixabay.com

Upotusöljyä käytetään vain 100X-objektiivin kanssa. Siksi 100X-tavoitetta kutsutaan myös upotuskohteeksi. Loput tunnetaan kuivina kohteina. Tätä linssiä ei voida käyttää ilman upotusöljyä, koska ilman sitä visualisointi ei olisi tyydyttävää.

Upotusöljyn päätehtävänä on tuottaa selkeämpiä, terävämpiä ja selkeämpiä kuvia, jotta voidaan tarkkailla yksityiskohtia, joita muiden linssien kanssa ei olisi mahdollista.

Ensimmäinen tähän tarkoitukseen käytetty öljy oli anisiöljy, jota käytettiin yhdessä Giovanni Battista Amicin luoman ensimmäisen upotuslinssin kanssa. Tämä esti vain kromaattisen aberraation, mutta ei lisännyt linssijärjestelmän numeerista aukkoa.

Sitten käytettiin setriöljyä, mutta sillä oli monia haittoja, jotka pakottivat sen käyttämättä. Niiden joukossa oli sen korkea happamuus, joka vahingoitti tavoitteita lyhyellä aikavälillä.

Myöhemmin käytettiin muita aineita, kuten vettä ja glyseriiniä, kunnes synteettiset upotusöljyt syntyivät, joita hiukan vähitellen jalostettiin, kunnes ne saavuttivat nykyisen upotusöljyn, joka on orgaanisten aineiden monimutkainen yhdiste.

Upotusöljyn koostumus

Upotusöljy koostuu orgaanisten yhdisteiden, kuten terfenyylin, hydratun terfenyylin, luonnollisten hiilivetyjen ja polybuteenien seoksesta.

Upotusöljyn ominaisuudet

Immersioöljy on vaaleankeltaista nestettä, jossa on hieman viskoosi ulkonäkö, jolla on tunnusomainen haju ja tiheys on välillä 0,92 ja 0,99 g / cm ³.

Upotusöljy ei liukene veteen, ja sen kiehumispiste on 340 ° C. Taitekerroin a (n 20 ° C / D): vaihtelee välillä 1,482 - 1,516. Samaan aikaan leimahdusindeksi on 110 ° C ja viskositeetti vaihtelee välillä 100 - 120 mPa.s.

Tämä tuote on hävitettävä asianmukaisesti, koska se on ympäristömyrkyllinen. Toisin sanoen, se on haitallista ympäristölle ja vaikuttaa pääasiassa vesieläimiin. Toisaalta se ärsyttää ihoa ja limakalvoja. Nieltynä se on munuaistoksinen ja sydänmyrkyllinen.

Upotusöljy on vakaa lämpötilassa 15-25 ° C, lämpötilassa, jossa se on varastoitava.

Upotusöljyn perusteet

Käytettäessä suurempia suurennuslinssejä valon voimakkuutta tulisi lisätä. Kuitenkin monet valonsäteistä menetetään, koska ne ovat hajallaan saavuttaessa ilmaa (kannen luiston ja linssin välinen tila), ja jopa jotkut säteet heijastuvat täysin.

Upotusöljyn taitekerroin on samanlainen kuin lasin. Siksi, kun öljy joutuu kosketukseen 100X-linssin ja suojakannen välillä, valonsäteet keskittyvät.

Konsentroidut säteet kulkevat näytteen läpi ja terävöittävät kuvaa, toisin sanoen lisäävät kohteen numeerista aukkoa ja ovat oikein kromaattisille ja pallomaisille poikkeavuuksille.

Käyttö tai sovellukset

Upotusöljyn käyttö on erityisen välttämätöntä, kun on tarpeen tarkkailla kuvaa laajemmin, käyttämällä suurinta suurennustavoitetta (100X-objektiivi) nähdäksesi yksityiskohdat, jotka ovat välttämättömiä diagnoosin määrittämisessä.

Siksi sitä käytetään laajasti mikroskooppitutkimuksissa erilaisilla alueilla, kuten histologia, sytologia, hematologia ja bakteriologia. Se on esimerkiksi hyödyllinen tutkittaessa potilaan solujen ja kudosten ominaisuuksia.

Sitä käytetään myös verirasvojen analysointiin, jossa haluamme yksityiskohtaisesti erittää hemoparasiittien ominaisuuksia punasolujen sisällä ja ulkopuolella, samoin kuin Gram-valmisteissa, mikro-organismien morfotointisten ominaisuuksien määrittelemiseksi.

Sitä käytetään yleensä kiinteissä valmisteissa, koska sitä ei suositella tuoreissa valmisteissa. Tämä johtuu siitä, että öljyn pintajännitys aiheuttaa peitelasin liikkumisen, aiheuttaen näytteen siirtymisen tarkkailun aikana ja estävän analyysin.

Toisaalta upotusöljy ei ole hyödyllinen vain tavanomaisessa valomikroskopiassa: sitä käytetään myös kokonaisen sisäisen heijastuksen fluoresenssimikroskoopeissa (TIRFM) ja konfokaalisissa fluoresenssisovelluksissa.

Vaiheet, joissa seurataan upotusöljyä käyttävää valmistetta

Jos haluat tarkastella diaa mikroskoopin alla, dia tulee ensin tarkentaa pienimmän suurennuskohteen kanssa, yleensä 10X, heikossa valon voimakkuudessa.

Sitten se menee 40X-objektiiviin, ja valopolku on hieman lisääntynyt. Jotkut analyysit voidaan suorittaa tällä suurennuksella, mutta 100x suurennus vaaditaan rakenteellisten yksityiskohtien näkemiseksi.

Ennen siirtymistä 100X-objektiiviin asetetaan tippa upotusöljyä kansilevylle oikeaan kohtaan, jonka haluat tarkkailla, ja sitten mikroskoopin torni siirretään 100x-objektin paikantamiseksi valmisteessa.

Valon voimakkuutta säädetään (lisätään) (liikuttamalla lauhdutinta ja avaamalla kalvo). Sitten muutaman pienen mikrometrin ruuvin liikkeen (eteen- tai taaksepäin) tulisi keskittyä täydellisesti, jos mikroskooppi käyttää parafocal-kohteita.

Jos yrität tarkentaa valmistetta suoraan upotuslinssillä, sinulla voi olla vaikeuksia tarkennuksen löytämisessä. Se ei ole mahdoton toimenpide, mutta vaikeus kasvaa huomattavasti.

Hoito

Upotusöljyn käyttämiseksi on otettava huomioon tietyt olosuhteet.

Kun on tehty värillinen valmiste, kuten Giemsa- tai Gram -värjätty kerros, odota, että se kuivuu kokonaan ennen öljykastetta. Muutoin öljy yhdessä veden kanssa muodostaa misellejä, jotka eivät anna valmisteen näkyvyyttä.

Toisaalta seurattuaan valmistuserää, toisin sanoen työpäivän lopussa, 100X-objektiivi on puhdistettava huolellisesti käyttämällä linssipaperia etanolilla. Jos linssi jätetään likaiseksi, öljy kuivataan siitä ja sen poistaminen on erittäin vaikeaa, mikä vahingoittaa näkökenttää.

Samoin on otettava huomioon, että öljy on syttyvää ja se on pidettävä erillään lämmönlähteistä (sytyttimistä). On tärkeää välttää sen kuumentamista yli 65 ° C: seen.

Viimeinkin öljy on myrkyllinen tuote. Siksi suoraa kosketusta ihon ja limakalvojen kanssa on vältettävä, koska se voi aiheuttaa lievää ärsytystä. Onnettomuuksien välttämiseksi on suositeltavaa käyttää käsineitä ja suojalaseja.

Jos ainetta joutuu kosketukseen öljyn kanssa, alue pestään runsaalla vedellä. Jos öljy roiskuu silmiin, se tulee pestä samalla tavalla pitäen silmät auki. Tahattoman nielemisen yhteydessä on tärkeää nauttia lämpimää vettä ja aiheuttaa oksentelua lähimpään lääkäriin menemisen lisäksi.

Viitteet

1. "Kokonainen sisäinen heijastusfluoresenssimikroskooppi." Wikipedia, ilmainen tietosanakirja. 30. joulukuuta 2018, 22:46 UTC. 14. toukokuuta 2019, 01:54
2. IVD. Mikroskopia Öljy upotus. Saatavana osoitteessa: Käyttäjät / Joukkue / Lataukset.
3. Ympäristöbiologia ja mikrobiologia. Optisen mikroskoopin toiminta. Saatavana: eumed.net/libros.
4. Sánchez Lera Rita María, Oliva García Ninfa Rosa. Mikroskoopin historia ja sen vaikutus mikrobiologiaan. Rev Hum Med, 2015; 15 (2): 355 - 372. Saatavana: scielo.
5. Herrero J. Harjoittelu nro 1: Yleisen yhdisteen optisen mikroskoopin perusteet ja käyttö. Universitat d´Alacant Saatavana osoitteessa rua.ua.es/dspace
6. Scharlau - KTT. Upotusöljy, mikroskopiaa varten. 2001. Saatavana osoitteessa: insumos-labcentral.