Preparaatti on diagnostinen väline oli aktiivinen pulmonaarinen tuberkuloosi. Se on laboratoriotekniikka, joka mahdollistaa happaman bakteerien, kuten Mycobacterium tuberculosis, havaitsemisen ja mittaamisen. Se on maailmanlaajuisesti käytetyin menetelmä aktiivisen keuhkotuberkuloosin diagnosoimiseksi yhteisössä ja hoidon hyötyjen arvioimiseksi.
Keuhkotuberkuloosi on Mycobacterium tuberculosis -bakteerin aiheuttama tartuntatauti, joka tartuttaa keuhkoja, mutta voi vaikuttaa muihin elimiin ja järjestelmiin. Maailmanlaajuisesti yli 6 miljoonaa ihmistä kärsii keuhkotuberkuloosista (TB).
M. tuberculosis -solut ysköspesuun (Lähde: Microrao / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0) Wikimedia Commonsin kautta)
Mycobacterium tuberculosis ja muut ei-tuberkuloosiset Mycobacterium-lajit omaavat soluseinämän lipidipäällysteen, joka on rikas mykolihapolla ja joka on resistentti hapon alkoholin värimuutoksille emäksisillä väriaineilla värjäytymisen jälkeen.
Siksi käytetään erityisiä värjäysmenetelmiä, kuten Ziehl-Neelsen-menetelmää. Nämä yksinkertaiset ja edulliset menetelmät antavat seinälle mahdollisuuden säilyttää tahra, kun näyte huuhdellaan happoliuoksella, ja Mycobacteriumin seinämä muuttuu punaiseksi toisin kuin muut sinisiksi muuttuvat bakteerit.
Siepumikroskopian tekemiseksi tarvitaan yskösnäyte, mieluiten otettava aamulla noustessasi. Kudosnäytteitä tai kehon nestenäytteitä voidaan myös käyttää.
Prosessi
Näytteet, jotka käsitellään särmämikroskopiaa varten, ovat yskösnäytteitä, kudosnäytteitä tai ruumiinesteitä. Kudosnäytteet voidaan ottaa bronkoskopialla tai imusolmukkeiden tai muiden kudosten biopsioilla.
Koska tuberkuloosi voi vaikuttaa mihin tahansa elimeen tai järjestelmään, näytteet voivat olla hyvin erilaisia, mukaan lukien: virtsanäytteet, aivo-selkäydinneste, keuhkopussin neste, askiittinen neste, veri, mätä avoimista onteloista, biopsiat, jne.
Pulmon ulkopuoliset leesionäytteet olisi myös käsiteltävä viljelyä varten. Räsunäytteet kerätään aamutunteina noustessaan.
Useita näytteitä voidaan kerätä peräkkäin tai peräkkäin. Näytteet tulisi merkitä suljetuissa, leveäsuisissa pulloissa. Heillä olisi oltava potilaan tiedot, näytteen tyyppi ja näytteenottopäivämäärä.
Tekninen menettely
- Kun näyte on saatu, se voidaan sentrifugoida väkevöimiseksi tai käyttää suoraan. Alkuvaiheessa asetetaan muutama tippa näytettä ja levitetään ne objektilasille.
- Näyte peitetään suodatetulla fuksinilla (värjäysliuos).
- Sitten sitä lämmitetään, kunnes saadaan noin kolme päästöä valkeanhöyryä.
- Odota viisi minuuttia, kunnes näyte jäähtyy, ja pese se vedellä.
- Se peitetään valkaisuliuoksella (hapan alkoholilla) 2 minuutin ajan.
- Se pestään uudelleen vedellä.
- Näyte peitetään metyleenisinisellä ja annetaan seistä minuutin.
- Pese vedellä.
- Anna sen kuivua ilmassa ja siirry tarkkailuun mikroskoopin alla.
Valokuva mikroskoopista (Kuva: Konstantin Kolosov osoitteessa www.pixabay.com)
Tämä menetelmä on nopea, yksinkertainen, edullinen ja antaa Mycobacterium tuberculosis -soluille värjäytyä punaiseksi. Tätä tekniikkaa kutsutaan Ziehl-Neelsen-värjäystekniikaksi.
Mikroskooppinen havainnointi koostuu hapannopeiden bacillien esiintymisen tunnistamisesta ja niiden kvantifioinnista kentän mukaan.
Mycobacterium tuberculosis -solut näkyvät punaisina, rakeisina, kaarevina sauvina sinisellä pohjalla. Ne voidaan eristää, parittaa tai ryhmitellä. Havainnot tulisi suorittaa kentäittäin ja vähintään 100 kenttää tulisi tutkia kutakin sivelyä kohden.
Tulosta pidetään positiivisena, kun kussakin kentässä on yli 10 M. tuberculosis -solua. Tämä vastaa 5000 - 100 000 bacillia kutakin millilitraa näytettä kohti.
Näissä tapauksissa sen katsotaan olevan positiivinen Mycobacterium tuberculosis -bakteerille, koska ei-kulttuurisilla Mycobacteriumilla tai muilla haponkestävillä bakteereilla on erilaisia muotoja ja yleensä kenttäkohtaisesti havaittu määrä on alle 10.
Näytteitä tutkivalla henkilöllä on oltava kokemusta tai asiantuntemusta näiden mikro-organismien havaitsemisesta ja tunnistamisesta, koska tuloksissa voi olla vääriä negatiivisia tai vääriä positiivisia.
On muitakin fluoroskooppisia tekniikoita, jotka ovat herkempiä, mutta paljon kalliimpia. Yhdessä sellaisessa tekniikassa käytetään Auramiini-O-värjäystä vihreän fluoresenssin saamiseksi tai Auramiini O / Rhodamine B -värjäystä keltaisen / oranssin fluoresenssin havaitsemiseksi.
Positiiviset tapaukset suoritetaan yleensä viljelmälle ja antibiogrammille diagnoosin ja asianmukaisen hoidon valinnan varmistamiseksi.
Mikä on särmämikroskopia?
Tuberkuloosi on tarttuva tauti, joka vaikuttaa keuhkoihin ja muihin kehon elimiin ja elinjärjestelmiin. Se on tarttuva tauti, joka aiheuttaa vakavia vammoja hengityselimille, ja jos sitä ei hoideta kunnolla, voi aiheuttaa potilaan kuoleman.
Tuberkuloosi tarttuu melkein yksinomaan ilmaan suspendoituneiden pisaroiden kautta keuhkotuberkuloosiin tartunnan saaneen potilaan oksennuksesta. Nämä pienet pisarat voivat jäädä ilmaan ja niillä on kyky tartuttaa henkilö, joka hengittää niitä.
M. tuberculosis -solut (Lähde: NIAID / CC BY (https://creativecommons.org/licenses/by/2.0) Wikimedia Commonsin kautta)
Infektio vaatii pitkäaikaista kosketusaikaa tartunnan saaneeseen potilaaseen, joka sylkee jatkuvasti bakteereja huonosti ilmastoidussa ympäristössä. Ihmiset, joilla on immuunipuutteita, tulevat todennäköisemmin tartunnan.
HIV-positiivisilla potilailla on todennäköisemmin kuin muulla väestöllä vakavia hengitystieinfektioita, mukaan lukien keuhkotuberkuloosi. Tästä syystä särmämikroskopia on nopea ja edullinen diagnoosimenetelmä tuberkuloosille.
Haisumikroskopia mahdollistaa tuberkuloosin bakteriologisen diagnoosin, mutta positiivinen tulos on vahvistettava muilla tutkimuksilla.
Tutkimuksiin, jotka vahvistavat tuberkuloosin diagnoosin, sisältyy radiologisia tutkimuksia, joissa näytetään keuhkojen ylempien keuhkojen ominaiskuvat, positiiviset tuberkuliinikokeet ja positiiviset näyteviljelmät.
Haju negatiivinen
Negatiivinen mikroskopia ei välttämättä sulje pois tuberkuloosin diagnosointia, koska etenkin näytteen ollessa yskös bakteerien poistuminen ei ole jatkuvaa. Siksi näissä tapauksissa, kun diagnoosia epäillään, sarjanäytteet ovat tarpeen.
Positiivinen tahri
Positiivinen levitysmikroskopia viittaa tuberkuloosiin, ja se on vahvistettava muilla täydentävillä tutkimuksilla. Aina kun tulos on positiivinen, viljely ja antibiogrammi on tehtävä.
Kun hoito on aloitettu, levien mikroskopian positiivisuusasteikon jatkuva lasku negatiivisten tulosten saamiseen asti antaa mahdollisuuden hallita hoidon hyötyjä.
Viitteet
- Aziz, MA (2002). AFB-uppomikroskopian ulkoinen laadunarviointi.
- Desikan, P. (2013). Röiden sivelymikroskopia tuberkuloosissa: onko se edelleen merkityksellinen? Intialainen lääketieteellisen tutkimuksen päiväkirja, 137 (3), 442.
- Fauci, AS, Kasper, DL, Hauser, SL, Jameson, JL ja Loscalzo, J. (2012). Harrisonin sisätautien periaatteet (osa 2012). DL Longo (Toimitus). New York: Mcgraw-hill.
- Ngabonziza, JCS, Ssengooba, W., Mutua, F., Torrea, G., Dushime, A., Gasana, M.,… ja Muvunyi, CM (2016). Siepumikroskopian diagnostinen suorittaminen ja Xpert: n inkrementaalisaanto keuhkotuberkuloosin havaitsemiseksi Ruandassa. BMC-tartuntataudit, 16 (1), 660.
- Sardiñas, M., García, G., Rosarys, MM, Díaz, R., ja Mederos, LM (2016). Bakilloskopian laadunvalvonnan merkitys laboratorioissa, jotka suorittavat tuberkuloosidiagnoosin. Chileläinen infektiologialehti: Chilen infektiologiayhdistyksen virallinen elin, 33 (3), 282-286.
- Sequeira de Latini, MD, ja Barrera, L. (2008). Tuberkuloosin bakteriologisen diagnoosin käsikirja: standardit ja tekninen opas: osa 1 sivelymikroskopia. Tuberkuloosin bakteriologisen diagnoosin käsikirjassa: standardit ja tekninen opas: osa 1 pintamikroskopia (s. 64-64).