CARY BLAIR MEDIUM: PERUSTEET, VALMISTELU JA KÄYTÖT - BIOLOGIA - 2026

Keskimääräinen Cary Blair on puolikiinteä agar, joita käytetään kuljetus- ja biologisen näytteiden kätkeminen suolistopatogeenejä, mikro-organismien ja anaerobisia labiili. Kuten kaikki kuljetusvälineet, sen tehtävänä on pitää näyte optimaalisissa olosuhteissa, kunnes sitä viljellään. Läsnä olevien patogeenisten mikro-organismien samoin kuin mukana olevan mikrobiotan on oltava elinkykyisiä, mutta lisäämättä niiden populaatiota.

Cary Blair Medium on seurausta Stuart Transport Medium -seoksen formulaatiomuutoksesta. Modifikaatio suoritettiin vuonna 1964 ja koostui pH: n säätelyjärjestelmän (glyserofosfaatti) korvaamisesta fosfatoidulla epäorgaanisella puskurilla.

A. Culturette Cary Blair -väliaineella B. Jakkarankeräjä Cary Blair -väliaineella. Lähde: A. Video Meganhow, hanki haavaviljely 2011 youtube.com B. Käyttäjä: Mattes

Uudelleenmuotoilu oli välttämätöntä, koska sen tekijät tajusivat, että jotkut saprofyyttiset bakteerit voivat metaboloida glyserofosfaatin tietyn ajan kuluttua. Nämä moninkertaistuvat päällekkäin läsnä olevien patogeenien kanssa.

Muita muutoksia olivat metyleenisinisen poistaminen, samoin kuin pH: n säätäminen emäksisyyteen (pH 8,4). Kaikki nämä muutokset paransivat kuljetusvälineiden tehokkuutta.

Alun perin Cary Blair -väliainetta käytettiin suolen patogeenien, kuten Shigella flexneri, Salmonella sp, Vibrio cholerae ja Campylobacter sp, ylläpitämiseen.

Seuraavaksi on kuitenkin havaittu tehokkuutta vaativien ja labiilien patogeenien, kuten Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis, Bordetella pertussis, Streptococcus pneumoniae ja eräiden anaerobien, elinkelpoisuuden säilyttämisessä.

Perusta

Cary Blair Medium sisältää natriumkloridia, natriumtioglykolaattia, dinatriumfosfaattia, kalsiumkloridia ja agaria.

Natriumkloridi ylläpitää väliaineen osmoottista tasapainoa, dinatriumfosfaatti ja kalsiumkloridi tasapainottavat pH: ta. Natriumtioglykolaatti puolestaan ​​ylläpitää matalaa hapettumisen ja pelkistyksen potentiaalia, kun taas pieni osa agaria tarjoaa puolikiinteän konsistenssin.

Cary Blair -väliaine ei sisällä ravitsevia aineita, koska kuljetusväliaineen tehtävänä on pitää näyte ilman, että se muuttuu kosteuden ja mikrobikuormituksen suhteen; ts. se välttää näytteen kuivumisen säilyttäen samalla läsnä olevien mikro-organismien elinkelpoisuuden ja määrän.

Lopuksi, hieman emäksinen pH estää mikro-organismien kuoleman happamuudella, etenkin Vibriot ovat erittäin herkkiä hapoille.

Valmistautuminen

Cary Blair -väliainetta on kaupallisesti saatavana erityisenä käyttövalmiina laitteena. Kuljetusjärjestelmä peitetään muovisella Peel Pack -laukulla. Sen sisällä on tamponi näytteen keräämistä varten ja säiliöputki Cary Blairin puolikiinteälle väliaineelle.

Markkinoilla on myös kaupallisia taloja, jotka toimittavat kuivattua väliainetta sen valmistamiseksi laboratoriossa.

Tätä varten punnitaan 13,2 g dehydratoitua väliainetta ja liuotetaan se litraan tislattua vettä. Kuumenna ja ravista valmistetta, kunnes se on täysin liuennut. Levitä väliaine ruuvattuihin koeputkiin (bakeliitti).

Höyrytäkää putkia 15 minuutin ajan. Annetaan jäähtyä ja pidetään huoneenlämpötilassa käyttöönottoon asti.

Unokokuloimaton Cary Blair -alusta voidaan säilyttää optimaalisesti jopa 18 kuukautta huoneenlämpötilassa.

Elatusaineen pH on asetettava arvoon 8,4 ± 0,2. Valmistetun väliaineen väri on beige, tietyllä opasenssilla.

Käyttää

Näytteiden tyyppi

Cary Blair Mediumia käytetään, kun ulosteenäytteitä, peräsuolen ja emättimen näytteitä ei voida käsitellä välittömästi.

Kun kuljetusvälineitä ei ole käytettävissä, näytteitä voidaan säilyttää -70 ° C: ssa.

Näytteenotto

Tamponi kyllästetään näytteellä ja se viedään Cary Blair -väliaineeseen saavuttamatta pohjaa.

Näytteen tunnistaminen

Cary Blair -väliaineella on oltava etiketti, johon perustiedot on sijoitettu, kuten: potilaan etu- ja sukunimi, näytteen tunnistenumero, näytteenoton lähde, hoitava lääkäri, keräyksen päivämäärä ja kellonaika. näyte, oletettu diagnoosi, antibioottihoito.

Siirtää

Tiiviisti peitetty ja kuljetettu huoneenlämpötilassa, kun kyse on ulostenäytteistä. Anaerobisia mikro-organismeja etsiville emättimenäytteille on suositeltavaa kuljettaa näytteet 4 ° C: ssa.

Kaikissa tapauksissa suositeltava siirtoaika on 4-6 tuntia, korkeintaan 24 tuntia.

Jos epäillään Campylobacter jejuni -bakteerin esiintymistä ulosteessa ja niitä ei voida käsitellä 24 tunnin sisällä, suositellaan säilyttämistä Cary Blair -väliaineessa 4 ° C: ssa.

Cary Blairin kuljetusvälineillä tehdyt tutkimukset

Useat tutkimukset ovat osoittaneet, että Cary Blair -väliaine voi pysyä elinkelpoisena Shigella- ja Salmonella-suvun enteropatogeenisille mikro-organismeille jopa 49 päivän ajan näytteen ottamisen jälkeen.

Vibrio cholerae, toinen tärkeä suolistopatogeeni, kykenee selviytymään 22 vuorokautta, kun taas Yersinia pestis (kupla- ja keuhkoputken aiheuttaja) voidaan toistaa 75 päivän kuluttua.

Näiden mikro-organismien talteenoton kestävyydestä huolimatta suositellaan kuitenkin, että otetut näytteet kuljetetaan Cary Blair -väliaineessa laboratorioon mahdollisimman nopeasti.

Samoin kun näyte on saavuttanut laboratorion, se on siemennettävä viipymättä vastaavaan elatusaineeseen.

Toisaalta, Cary Blair -väliainetta suositellaan anaerobisia patogeenejä sisältävien näytteiden lisäksi käytännöllisten mikro-organismien kuljettamiseen.

Tässä mielessä DeMarco ym. Suorittivat vuonna 2017 tutkimuksen nimeltä: Emättimen mikro-organismien selviäminen kolmessa kaupallisesti saatavassa kuljetusjärjestelmässä.

He osoittivat, että Cary Blairin kuljetusväliaine on paras kuljetusväliaine emättimen anaerobisten mikro-organismien säilyttämiseksi ja palauttamiseksi. Samoin he osoittivat, että suurin talteenottoaste saavutettiin, kun siirtolämpötila oli 4 ° C.

Siksi päätellään, että emättimen näytteiden (anaerobisten mikro-organismien) kuljetuslämpötilan tulisi olla 4 ° C. Fekaalinäytteille, kun etsitään fakultatiivisia mikro-organismeja, ihanteellinen lämpötila on huoneenlämpö.

QA

Cary Blair -kuljetusväliaineen laadunvalvonnan arvioimiseksi kannat, jotka tunnetaan nimellä Shigella sonnei ATCC 11060, Salmonella choleraesuis ATCC 14028, Vibrio cholerae ja Campylobacter sp.

Elatusaine ympätään valitulla kannalla ja pidetään huoneenlämpötilassa 24 tuntia. Sitten ne kylvetään vastaavaan elatusaineeseen. Kaikissa tapauksissa kyseisen mikro-organismin odotetaan tyydyttävän palautumisen.

Viitteet

1. DeMarco AL, Rabe LK, Austin MN, et ai. Emättimen mikro-organismien selviytyminen kolmella kaupallisesti saatavalla kuljetusjärjestelmällä. Anaerobinen. 2017; 45: 44–49.
2. Wasfy M, Oyofo B, Elgindy A, Churilla A. Säilytysaineiden vertailu ulostenäytteiden säilytykseen. J Clin Microbiol. tuhatyhdeksänsataayhdeksänkymmentäviisi; 33 (8): 2176–2178.
3. Dan M, Richardson J, Miliotis MD, Koornhof HJ. Säilöntäaineiden ja jäädyttämisolosuhteiden vertailu ulosteenäytteiden säilyttämiseen. J Med Microbiol. 1989; 28 (2): 151-4.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinen diagnoosi. 5. toim. Toimituksellinen Panamericana SA Argentina.
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott: n mikrobiologinen diagnoosi. 12 toim. Toimituksellinen Panamericana SA Argentina.
6. Conda Pronadisa Laboratories. Puoli Cary Blair. Saatavana osoitteessa: condalab.com
7. Metrix-laboratorio. Cary Blair. Saatavana osoitteessa: metrixlab.mx