STUART-ALUSTA: PERUSTA, VALMISTELU JA KÄYTTÖ - BIOLOGIA - 2026

Väliaine Stuart on puolikiinteä agar tai liemi ilman ravinteita, joita käytetään kuljetukseen biologisista näytteistä. Sen tarkoituksena on pitää näytteessä olevat kannat kannattavana tietyn ajan, mutta lisäämättä mikrobipopulaatiota.

Sen ovat luoneet Moffet, Young ja Stuart vuonna 1948, ja myöhemmin Toshach ja Patsula. Se koostuu natriumglyserofosfaatista, natriumtioglykolaatista, kalsiumkloridista ja agar-agarista. Jälkimmäistä on läsnä puolikiinteässä väliaineessa eikä sitä ole nesteessä. Jotkut laboratoriot lisäävät siihen metyleenisinistä.

Culturette Stuart-kuljetuksella. Lähde: Kirjoittaja: CDC / Dr. Gilda Jones, kohteliaisuus: Kansanterveyskuvakirjasto

Niitä käytetään yleensä silloin, kun näytettä ei ole mahdollista kylvää heti. Tässä tapauksessa näyte asetetaan kuljetusväliaineeseen samalla kun se siirretään laboratorioon, joka käsittelee viljelmää.

Tällä tavalla taataan, että läsnä olevat mikro-organismit pysyvät hengissä, kunnes ne inokuloidaan vastaavaan elatusaineeseen.

Aluksi sen tarkoituksena oli kuljettaa virtsaputken tai emättimen näytteitä, joissa epäillään Neisseria gonorrhoeae -taudin esiintymistä. Myöhemmin he tajusivat, että sen hyödyllisyys voisi olla laajempi.

Stuart-väliaine osoittautui erittäin tehokkaaksi muun muassa labiilien ja vaativien mikro-organismien, kuten Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertusis, säilyttämisessä. Muiden ei-ärsyttävien mikro-organismien, kuten enterobakteerien, lisäksi.

Stuart-väliaine estää periaatteessa näytteen kuivumisen, ylläpitää osmoottista tasapainoa ja säilyttää mikro-organismit ihanteellisessa pH: ssa. Toisaalta strategisesti tämä väliaine ei sisällä ravintoaineita, estäen siten mikro-organismien lisääntymisen.

Markkinoilla on erityisiä näytteensiirtolaitteita, jotka sisältävät tämän tai muun kuljetusvälineen, nimeltään culturette. Niitä voidaan valmistaa myös laboratoriossa.

Perusta

Stuart-kuljetusmuodon tarkoituksena on pitää näytteet niin lähellä alkuperäistä tilaa, kunnes ne käsitellään.

Natriumglyserofosfaatti ja kalsiumkloridi on puskurijärjestelmä, joka toimii pitämällä pH ja osmolaarisuus.

Sillä välin natriumtioglykollaatti toimii pelkistysaineena ja jos kyseessä on agari, se antaa sille puolikiinteän konsistenssin väliaineen hapettumisen viivästymiseksi. Lopuksi metyleenisininen on hapettumisen indikaattori, eli se havaitsee hapen läsnäolon.

Puolikiinteä väliaine redox-indikaattorilla on ihanteellinen näytteiden kuljettamiseen, jos epäillään anaerobisten bakteerien esiintymistä.

Kuljetusvälineiden ominaisuudet

Stuart-väline, kuten kaikki kuljetusvälineet, täyttää tietyt ominaisuudet, mukaan lukien:

- Säilyttää läsnä olevat elinkelpoiset mikrobikannot lisääntymättä.

-Ei sisällä ravintoaineita; Sen yhdisteiden tarkoituksena on pitää näyte hydratoituneena riittävissä pH- ja osmolaarisuusolosuhteissa.

- Estää joidenkin herkkien mikro-organismien, kuten pneumokokin, autolysaattia.

- Sen käyttö on väliaikaista, sitä ei pidä jatkaa liian kauan.

Valmistautuminen

Puolijähmeä Stuart-väliaine redox-indikaattorilla

Kodin valmistelu

ainekset

Natriumglyserofosfaatti 10 gr

Natriumtioglykolaatti 1,0 g

Kalsiumkloridi 0,1 gr

Metyleenisininen 0,002 gr

Agar-agar 3 gr

Tislattu vesi 1 l

Sekoita komponentit ja kuumenna, kunnes se on täysin liuennut. Kaada putkiin tai erikoispuikkoihin. Ne viedään autoklaaviin ja steriloidaan 121 ° C: ssa 15 minuutin ajan. Anna putkien jäähtyä pystysuorassa asennossa (lohkon muodossa). Pidä huoneenlämmössä.

Valmistus kaupallisella väliaineella

Punnitaan 14,1 g väliainetta 1 litrassa tislattua vettä. Lämpö ravistaen usein, kunnes se on täysin liuennut, se voidaan keittää. Loput menettelystä, kuten jo kuvattiin.

Kuivattu väliaine on kermanväristä ja valmistetun tulisi olla sinistä sen pinnalla. Tämä johtuu metyleenisinisestä läsnäolosta.

Elatusaineen pH on asetettava arvoon 7,4 ± 0,2

Nestemäinen modifioitu Stuart Medium (kotitekoinen)

ainekset

Natriumglyserofosfaatti 10 gr

Natriumtioglykolaatti 1 g

Kalsiumklorididihydraatti 0,1 g

Tislattua vettä 1000 ml

Sillä on samat ainesosat kuin puolikiinteällä aineella, mutta siinä ei ole agaria tai metyleenisinistä. Tässä tapauksessa komponentit sekoitetaan ilman kuumennusta ja 0,5 ml jaetaan 16 x 125 mm: n putkiin, joissa on kierrekorkit.

Se steriloidaan autoklaavissa 121 ° C: ssa 10 minuutin ajan. Näytteenottoon on käytettävä dakronipuikot, jos näyte on tarkoitettu PCR: lle, tai rayon, jos se on viljelmää varten.

Putkia varastoidaan huoneenlämpötilassa.

Sovellukset

Kaupallisesti on olemassa erityisiä näytteensiirtolaitteita, joita kutsutaan kulttuuriksi; Tämä laite on pitkänomainen, ohut putki, jonka sisällä on tamponi, ja lopussa on segmentti, joka sisältää puolikiinteän tai nestemäisen Stuart-väliaineen.

Laite avataan ja näyte otetaan tamponilla. Sitten se viedään takaisin putkeen, kunnes tamponin kärki työnnetään puolikiinteään kuljetusväliaineeseen; Jotkut tuovat nestemäisellä Stuart-väliaineella kyllästetyn polyuretaanisienen, jolla näyte säilytetään pitämällä se märkä.

Jos epäillään herkkien mikro-organismien esiintymistä, näytteen keräämiseen on käytettävä puuhiilejä, joissa on puuhiiltä.

Näytteet, jotka voidaan ottaa tampoilla tai pyyhkeillä ja siirtää tässä väliaineessa, ovat nielun eritteet, peräsuolen otokset ja erilaiset eritteet, mukaan lukien: emättimen, virtsaputken, haavan, silmän, korvan ja paise.

Siirrettäessä näytettä kuljetusväliaineessa laboratorioon on vältettävä väliaineen altistamista äärimmäisille ympäristöolosuhteille (liian kylmä tai liian kuuma). Ilmanpaineen äkillisiä muutoksia tulisi myös välttää.

Aika, jolloin väliaine kykenee pitämään mikro-organismin elinkelpoisena, riippuu kyseisestä kannasta. Esimerkiksi Neisserias- ja Haemophilus-suvun mikro-organismeilla ne voivat pysyä elinkelpoisina jopa 24 tuntia, mutta kannat, kuten Salmonella tai Shigella, voivat kestää päiviä ja jopa viikkoja.

Jos näytteen käsittelyn arvioidaan kestävän yli 4 päivää, on edullista jäädyttää näyte -70 ° C: ssa.

Näytteen tunnistaminen kuljetusvälineissä

Valmistetuilla kuljetusvälineillä tai kaupallisilla viljelmillä on oltava etiketti, johon asetetaan seuraavat tiedot:

Potilaan etu- ja sukunimi: vältetään näytteen sekaannusta.

Tunnistusnumero: tilauksen pitäminen työssä on kätevää.

Näytteenottolähde: auttaa bakteriologia valitsemaan sopivan kasvualustan.

Hoitava lääkäri: Joskus se on tarpeen mahdollisille neuvotteluille.

Näytteenoton päivämäärä ja kellonaika: se on välttämätöntä näytteen hyväksymiselle tai hylkäämiselle näytteenoton ja laboratoriossa vastaanoton välisen ajan kuluttua.

Muut tiedot, jotka olisi erittäin hyödyllistä liittää, ovat:

Oletettu diagnoosi: ohjaa erityisten elatusaineiden lisäämistä epäillyn diagnoosin mukaan.

Antibioottinen hoito: on hyödyllistä liittää mukaan antiiogrammiin.

Kaikki nämä tiedot ovat välttämättömiä näytteiden asianmukaisen käsittelyn varmistamiseksi.

QA

Stuart-väliaineen suorituskyvyn arvioimiseksi voidaan tunnettuja kantoja ympätä ja pitää 25 ° C: ssa, kuten: Bordetella pertussis ATCC 9340, Haemophilus influenzae ATCC 19418, Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424, Neisseria meningitidis ATCC 13090, Streptococcus pneumoniae.

Kaikissa tapauksissa on odotettavissa, että kyseinen mikro-organismi otetaan talteen 24 tunnin ajan.

Toisaalta, muita kantoja voidaan käyttää, kuten: Shigella flexneri ATCC 12022, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Streptococcus pyogenes ATCC 12344, Enterococcus faecalis ATCC 33186, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 ja Escherichia coli ATCC.

Kaikissa tapauksissa odotetaan runsasta toipumista jopa 96 tunniksi.

rajoitukset

Jotkut tutkimukset vakuuttavat, että Stuart-väliaineessa oleva glyserofosfaatti voidaan metaboloida joidenkin kolibakteerien muodossa, muiden gram-negatiivisten bakteerien joukossa, ja siten moninkertaistua tässä väliaineessa.

Tämä riski kasvaa sitä pidempään, kun näytteen käsittely viivästyy. Samoin Stuart-väliaineen altistuminen korkeille lämpötiloille kuljetuksen aikana vaikuttaa tähän.

Viitteet

1. "Kuljetusväliaine (mikrobiologia)." Wikipedia, ilmainen tietosanakirja. 13. huhtikuuta 2018, 10:36 UTC. 1. huhtikuuta 2019. Saatavissa osoitteessa: es.wikipedia.org
2. Microkit Laboratories: Kasvatusliuokset. Stuart kuljetus. Saatavana: Saatavana osoitteessa: Medioscultivo.com
3. LabLisan. Stuartin kuljetusvälineet. Saatavana osoitteessa: lablinsan.cl
4. Tieteellinen MDM. Stuartin mikrobiologisen kuljetusväliaineen edut. Saatavana osoitteessa: mdmc Scientifica.com
5. Metrix Laboratories. Stuart. 2017.Saatavilla osoitteessa: metrixlab.mx
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott: n mikrobiologinen diagnoosi. 12 toim. Toimituksellinen Panamericana SA Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiologinen diagnoosi. 5. toim. Toimituksellinen Panamericana SA Argentina.