PIMEÄKENTTÄMIKROSKOOPPI: OMINAISUUDET, OSAT, TOIMINNOT - BIOLOGIA - 2026

Pimeäkenttämikroskooppia on erityinen optinen laite käyttää tietyissä laboratorioissa. Tämä on seurausta muutoksesta, joka on tehty valokenttämikroskopiaan. Darkfield-mikroskopia voidaan suorittaa transvalaistuksella tai epi-valaistuksella.

Ensimmäinen perustuu suoraan lauhduttimeen saavuttavien valonsäteiden estämiseen käyttämällä laitteita, jotka toimivat ennen kuin valonsäteet saavuttavat lauhduttimen.

Tummakenttämikroskooppi / tummakenttämikroskoopeissa näkyvät treponemit. Lähde: Dietzel65 / Judith Miklossy, Sandor Kasas, Anne D Zurn, Sherman McCall, Sheng Yu ja Patrick L McGeer

Tumma kenttä läpäisyllä valolla mahdollistaa rakenteiden korostamisen, koska ne voivat havaita erittäin ohuita hiukkasia. Rakenteet näkyvät jollain taiteella tai kirkkaudella tummalla taustalla.

Samalla kun epi-valaistusvaikutus saavutetaan tulevalla tai vinossa valolla. Tässä tapauksessa mikroskooppi on varustettava erityisellä puolikuun muotoisella suodattimella.

Tulovalaistuksen yhteydessä havaituille rakenteille on ominaista visuaalisen tehon esitys suurella helpotuksella. Tämä ominaisuus mahdollistaa suspendoituneiden hiukkasten reunojen korostamisen.

Toisin kuin valokenttämikroskopia, tummakenttämikroskopia on erityisen hyödyllinen suspendoituneita hiukkasia sisältävien freskolasien visualisoimiseksi ilman värjäämistä.

Sillä on kuitenkin useita haittoja, mukaan lukien se, että sitä ei voida käyttää kuiviin tai värjättyihin valmisteisiin. Sillä ei ole hyvää resoluutiota. Lisäksi hyvän kuvan takaamiseksi tavoitteiden numeerinen aukko ei saa ylittää lauhduttimen aukkoa.

ominaisuudet

Tummakenttämikroskoopin koostumus esittää tärkeitä modifikaatioita kirkkaan kentän suhteen, koska molempien mikroskopioiden perusteet ovat vastakkaiset.

Vaikka kirkkaassa kentässä valonsäteet keskittyvät niin, että ne kulkevat näytteen läpi suoraan, pimeässä kentässä säteet ovat hajallaan siten, että vain viistot säteet saavuttavat näytteen. Sitten sama näyte hajottaa ne, välittäen kuvan kohti objektiivia.

Jos keskityisit dioihin ilman näytettä, havaitaan tumma ympyrä, koska ilman näytettä mikään ei voi hajottaa valoa kohti tavoitetta.

Halutun vaikutuksen saavuttamiseksi näkökentässä tarvitaan tiettyjen lauhduttimien sekä kalvojen, jotka auttavat ohjaamaan valonsäteitä, käyttö.

Pimeän kentän näkökentässä suspensiossa olevat elementit tai hiukkaset näyttävät kirkkailta ja taiteellisilta, kun taas loput kenttä on tumma, mikä tekee täydellisen kontrastin.

Jos käytetään vinoa tai tulevaa valoa, saavutetaan havaittuihin rakenteisiin reunaefekti, jolla on suuri helpotus.

Pimeäkenttämikroskoopin osat

Lähde: amazon.com

-Mekaaninen järjestelmä

Putki

Se on laite, jonka läpi objekti heijastaa ja suurentaa kuvaa, kunnes se saavuttaa okulaarin tai okulaarien.

herättää

Se on tuki, missä eri tavoitteet sijaitsevat. Kohteita ei ole kiinteitä, ne voidaan poistaa. Revolveria voidaan kiertää siten, että tavoitetta voidaan muuttaa, kun käyttäjä sitä tarvitsee.

Makroruuvi

Tätä ruuvia käytetään näytteen fokusointiin, se liikkuu eteenpäin tai taaksepäin tuodakseen näytteen lähemmäksi tai kauempana kohteesta, ja liike on groteski.

Mikrometrin ruuvi

Mikrometriruuvia siirretään eteen- tai taaksepäin näytteen siirtämiseksi lähemmäksi tai kauemmaksi kohteesta. Mikrometristä ruuvia käytetään erittäin hienoihin tai hienoihin liikkeisiin, melkein huomaamatta. Se on se, joka saavuttaa perimmäisen keskittymisen.

Platen

Se on tuki, jossa näyte lepää objektilasilla. Siinä on keskiaukko, jonka läpi valonsäteet kulkevat. Kun makro- ja mikrometriruuveja siirretään, askel nousee ylös tai alas ruuvin liikkeestä riippuen.

Auton

Kuljetus mahdollistaa koko näytteen kuljettamisen tavoitteen kanssa. Sallitut liikkeet ovat edestakaisin ja päinvastoin, vasemmalta oikealle ja päinvastoin.

Pidä pihdit

Ne sijaitsevat lavalla, on valmistettu metallista ja on tarkoitettu pitämään liukumäki estämään sen liikkumista tarkkailun aikana. On tärkeää, että näyte pysyy kiinteänä sen tarkkailemisen ajan. Kiinnittimet ovat tarkalleen kooltaan vastaanottaa dio.

Varsi tai kahva

Varsi liittyy putkeen jalustan kanssa. Se on paikka, jossa mikroskooppia on pidettävä, kun sitä siirretään sivulta toiselle. Yhdellä kädellä käsivarsi tarttuu kiinni ja alustaa pidetään toisella kädellä.

Pohja tai jalka

Kuten nimensä osoittaa, se on mikroskoopin perusta tai tuki. Alustan ansiosta mikroskooppi pystyy pysymään kiinteänä ja vakaana tasaisella pinnalla.

-Optinen järjestelmä

tavoitteet

Ne ovat lieriömäisiä. Niiden alareunassa on linssi, joka suurentaa näytteestä tulevaa kuvaa. Tavoitteet voivat olla erilaisia ​​suurennuksia. Esimerkki: 4.5X (suurennuslasi), 10X, 40X ja 100X (upotusobjektiivi).

Upotustavoite on niin kutsuttu, koska se vaatii muutaman öljypisaran sijoittamisen kohteen ja näytteen väliin. Muita kutsutaan kuiviksi kohteiksi.

Tavoitteet on painettu niillä ominaisuuksilla, joita heillä on.

Esimerkki: valmistajan tuotemerkki, kentän kaarevuuskorjaus, aberraation korjaus, suurennus, numeerinen aukko, erityiset optiset ominaisuudet, upotusväliaine, putken pituus, polttoväli, kannen paksuus ja koodirengas väri.

Linsseissä on etulinssi alhaalla ja takana linssi yläosassa.

okulaarit

Vanhat mikroskoopit ovat monokulaarisia, ts. Niissä on vain yksi okulaari, ja modernit mikroskoopit ovat kiikareita, ts. Niillä on kaksi okulaaria.

Okulaarit ovat lieriömäisiä ja onttoja. Niissä on lähentyvät linssit, jotka laajentavat objektiivin luomaa virtuaalikuvaa.

Okulaari liittyy putkeen. Jälkimmäinen antaa objektiivin välittämän kuvan päästä okulaariin, joka suurentaa sitä uudelleen.

Okulaarin yläosassa on linssi, jota kutsutaan okulaariksi, ja sen alaosassa on linssi, jota kutsutaan keräilijäksi.

Siinä on myös kalvo ja sijainnistaan ​​riippuen sillä on nimi. Niitä, jotka sijaitsevat molempien linssien välillä, kutsutaan Huygens-okulaariksi ja jos se sijaitsee kahden linssin jälkeen, sitä kutsutaan Ramsden-okulaariksi. Vaikka on monia muita.

Okulaarin suurennus on välillä 5X, 10X, 15X tai 20X mikroskoopista riippuen.

Operaattori voi tarkastella näytettä okulaarin tai okulaarien kautta. Joidenkin mallien vasemmassa okulaarissa on rengas, joka on siirrettävissä ja mahdollistaa kuvan säätämisen. Tätä säädettävää rengasta kutsutaan diopterirenkaksi.

-Valaisujärjestelmä

Lamppu

Se on valaistuksen lähde ja sijaitsee mikroskoopin alaosassa. Valo on halogeeni ja sitä säteilee alhaalta ylöspäin. Yleensä mikroskooppien valaisin on 12 V.

pallea

Pimeäkenttämikroskooppien kalvosta puuttuu iiris; tässä tapauksessa tämä estää lampusta tulevia säteitä pääsemästä suoraan näytteeseen, vain viistot säteet koskettavat näytettä. Ne näytteen läsnä olevat rakenteet hajauttavat palkit, jotka ohittavat kohteen.

Tämä selittää, miksi rakenteet näyttävät kirkkaalta ja valoisalta pimeässä kentässä.

lauhdutin

Pimeäkentämikroskoopin lauhdutin eroaa kirkkaan kentän lauhduttimesta.

Tyyppejä on kahta: taitekondensaattorit ja heijastuskondensaattorit. Jälkimmäinen puolestaan ​​on jaettu kahteen luokkaan: paraboloidit ja kardioidit.

Taitekondensaattorit

Tämän tyyppisessä lauhduttimessa on levy, joka on sijoitettu taistelemaan valonsäteet. Se voi sijaita etulinssin yläpuolella tai takana.

Tällaisen lauhduttimen improvisointi on erittäin helppoa, koska riittää, että laitetaan lauhduttimen etulinssin eteen levy, joka on valmistettu mustasta pahvista ja on pienempi kuin linssi (kalvo).

Kirkkaan kentän valomikroskooppi voidaan muuntaa pimeäkenttämikroskoopiksi tämän kärjen avulla.

Heijastuskondensaattorit

Niitä käyttävät stereoskooppiset mikroskoopit. Niitä on kahta tyyppiä: paraboloidit ja kardioidit.

• Paraboloidit: heillä on tyyppinen kaarevuus, jota kutsutaan paraboloideiksi, koska ne ovat samankaltaisia ​​parabolien kanssa. Tämän tyyppisiä jäähdyttimiä käytetään laajalti kufien tutkimuksessa, koska niiden avulla voidaan tarkkailla treponemeja.
• Kardioidi: lauhduttimen kaarevuus on samanlainen kuin sydän, tästä syystä nimi "kardioidi", jolloin lauhduttimella on sama nimi. Siinä on kalvo, jota voidaan säätää.

ominaisuudet

- Sitä käytetään tutkimaan Treponema pallidumin esiintymistä kliinisissä näytteissä.

-On hyödyllistä tarkkailla myös Borreliaa ja Leptospiraa.

-Se on ihanteellinen tarkkailemaan solujen tai mikro-organismien in vivo -käyttäytymistä, kunhan erityisten rakenteiden määrittäminen ei ole tarpeen.

-On ihanteellinen tuoda esiin kapseli tai mikro-organismien seinämä.

Etu

-Tämäkenttämikroskoopit, joissa on taitelauhdutin, ovat halvempia.

-Sen käyttö on erittäin hyödyllistä 40X-suurennuksessa.

- Ne ovat ihanteellisia havainnoimaan näytteitä, joiden taitekerroin on samanlainen kuin väliaine, jossa ne löytyvät. Esimerkiksi soluviljelmissä, hiivassa tai liikkuvissa bakteereissa, kuten spirosketeissa (Borrelias, Leptospiras ja Treponemas).

-Solu voidaan havaita in vivo, mikä mahdollistaa sen käyttäytymisen arvioinnin. Esimerkiksi, muun muassa ruskealainen liikkuvuus, flagellan liikkuminen, liikkuminen pseudopodien säteilyllä, mitoottisen jakautumisen prosessi, toukkien kuoriutuminen, hiivojen punoitus, fagosytoosi.

- Sen avulla voidaan korostaa rakenteiden, esimerkiksi kapselin ja soluseinän, reunat.

- Hajotettuja hiukkasia on mahdollista analysoida.

-Väriaineiden käyttö ei ole välttämätöntä.

haitat

- Valmisteita kiinnitettäessä on noudatettava erityistä varovaisuutta, koska jos ne ovat liian paksuja, niitä ei tarkkailla hyvin.

-Kuvien resoluutio on alhainen.

-Tämäkenttämikroskoopeilla, joissa käytetään taitekestäviä lauhduttimia, on erittäin alhainen valoisuusprosentti.

- Kuvanlaadun parantamiseksi upotusobjektilla (100X) on tarpeen vähentää objektien numeerista aukkoa ja lisätä siten valaisevan kartion aukkoa. Tätä varten on välttämätöntä sisällyttää lisäkalvo, joka voi säätää objektiivin numeerista aukkoa.

- Et voi visualisoida kuivavalmisteita tai värillisiä valmisteita, elleivät ne ole elintärkeitä väriaineita.

-Se ei salli tiettyjen, etenkin sisäisten rakenteiden visualisointia.

-Pimeän kentän mikroskoopit ovat kalliimpia.

Viitteet

1. "Pimeäkenttämikroskooppi." Wikipedia, ilmainen tietosanakirja. 26. elokuuta 2018, 00:18 UTC. 30. kesäkuuta 2019, 01:06
2. Agudelo P, Restrepo M, Moreno N. Leptospiroosin diagnoosi verinäytteistä ja viljelmästä havaitsemalla pimeäkenttämikroskoopilla. Biolääketieteen. 2008; 28 (1): 7-9. Saatavana osoitteesta: scielo.org
3. Rodríguez F. Optisten mikroskooppien tyypit. Kliinisen ja biolääketieteellisen laboratorion blogi. Saatavana osoitteessa: franrzmn.com
4. Wikipedian avustajat. Pimeäkenttämikroskopia. Wikipedia, ilmainen tietosanakirja. 19. lokakuuta 2018, kello 00:13 UTC. Saatavana osoitteessa: wikipedia.org
5. Bhatia M, Umapathy B, Navaneeth B. Pimeäkenttämikroskopian, viljelyn ja kaupallisten serologisten sarjojen arviointi leptospiroosin diagnosoinnissa. Intialainen J Med Microbiol. 2015; 33 (3): 416 - 21. Saatavana: nlm.nih.gov